Ključna razlika med kromosomskim pasom in kromosomskim slikanjem je, da je kromosomski pas tehnika barvanja, ki prikazuje regije kromosomov v razločljivih temnih in svetlih pasovih, vendar je kromosomsko slikanje hibridizacijska tehnika, pri kateri so določene regije ali segmenti kromosomov pobarvan s fluorescentno označenimi sondami, specifičnimi za zaporedje.
V citogenetiki je za identifikacijo kromosomov in njihovih aberacij potrebno izdelati viden kariotip organizma. Povezovanje kromosomov in slikanje kromosomov sta dve citogenetski tehniki, ki pomagata pri vizualizaciji kromosomov. Obe tehniki sta uporabni pri prepoznavanju genetskih motenj.
Kaj je vezanje kromosomov?
Chromosome banding je tehnika obarvanja, ki prikazuje izmenično svetle in temne pasove ali področja vzdolž dolžine kromosoma. Trak se nanaša na del kromosoma, ki se jasno razlikuje od sosednjih segmentov tako, da je videti temnejši ali svetlejši. Da bi ustvarili temne in svetle pasove, je treba kromosome obarvati z ustreznim barvilom, kot je fluorescentno barvilo kinakrin ali barvanje po Giemsi.
Obstaja več vrst tehnik povezovanja kromosomov. Med njimi so Q-banding, Reverse (R) banding in G-banding splošne tehnike povezovanja. Tehnika pasov G uporablja barvanje, imenovano barvanje po Giemsi, in obarva področja heterokromatskih regij, bogata z AT, v temno obarvanih pasovih in evkromatična območja, bogata z GC, v rahlo obarvanih pasovih. Trak R je obratna stran pasov G in obarva regije, bogate z GC, v temnih pasovih in regije, bogate z AT, v svetlih pasovih. Po drugi strani pa pas Q uporablja fluorescenčno barvilo kinakrin in obarva kromosome v rumeni fluorescenci različne intenzivnosti. C banding tehnika je druga tehnika bandinga, ki obarva centromerne regije. Poleg tega tehnika T banding vizualizira regije telomer.
Slika 01: Kromosomski pasovi
Vzorec pasov je edinstven za organizme. Zato so ti edinstveni vzorci pasov pomembni pri prepoznavanju kromosomov in odkrivanju kromosomskih aberacij (kromosomski zlom, izguba, podvajanje, translokacija ali obrnjeni segmenti).
Kaj je slikanje kromosomov?
Poslikava kromosomov je tehnika, pri kateri so specifične regije ali segmenti kromosomov pobarvani s sondami, specifičnimi za zaporedje, ki so fluorescentno označene. Zato je kromosomsko slikanje vedno povezano z in situ tehniko FISH. V celoti temelji na molekularni hibridizaciji s sondami, specifičnimi za zaporedje, na kromosomih. Zato potrebuje posebne sonde za hibridizacijo ciljnih kromosomov ali kromosomskih regij.
Slika 02: Kromosomska slika
Poleg tega ta tehnika na začetku zahteva denaturacijo ciljne kromosomske DNK, ki je v metafazi. Drugič, stopnja hibridizacije poteka s sondami. Ko sonde najdejo svoje komplementarne sekvence, se hibridizirajo s specifičnimi regijami kromosoma. Hibridizirana mesta lahko enostavno opazujemo z uporabo avtoradiografije ali imunofluorescence. Priprava sond, denaturacija, hibridizacija in vizualizacija so štirje glavni koraki kromosomskega slikanja.
Kar zadeva aplikacije, je kromosomsko slikanje uporabno pri prepoznavanju kromosomskih preureditev, prelomnih točk in pri določanju zunajkromosomskih materialov. Poleg tega je močno orodje pri natančni lokalizaciji različnih genskih zaporedij kromosomov na mikroskopski ravni. Poleg tega je kromosomsko slikanje koristno pri identifikaciji genov za želene znake v kromosomih.
Kakšne so podobnosti med vezanjem kromosomov in poslikavo kromosomov?
- Povezovanje kromosomov in slikanje kromosomov sta dve tehniki, ki se uporabljata v citogenetskih analizah.
- Obe tehniki vizualizirata kromosome običajno v metafazi.
- Te tehnike lahko prepoznajo normalne kromosome in aberacije.
- Poleg tega so te tehnike resnično uporabne pri prepoznavanju genetskih motenj.
Kakšna je razlika med kromosomskim pasom in poslikavo kromosomov?
Chromosome banding je tehnika obarvanja, ki prikazuje dele kromosomov v temnih in svetlih trakovih, ki se razlikujejo. Slikanje kromosomov je medtem tehnika hibridizacije, ki pobarva specifične regije kromosomov s sondami, specifičnimi za zaporedje, ki so fluorescentno označene. Torej, to je ključna razlika med kromosomskim pasom in slikanjem kromosomov. Poleg tega kromosomski trakovi povzročijo izmenično temne in svetle pasove vzdolž dolžine kromosoma, medtem ko kromosomsko barvanje povzroči fluorescentno označena področja kromosomov.
Poleg tega je povezovanje kromosomov odvisno od sposobnosti kromosomske DNK, da se obarva z barvilom, medtem ko je barvanje kromosomov odvisno od molekularne hibridizacije s sondami, specifičnimi za zaporedje, na kromosomih. To je pomembna razlika med kromosomskim pasom in slikanjem kromosomov. Poleg tega, za razliko od vezanja kromosomov, tehnika slikanja kromosomov zahteva fluorescentno označene sonde, specifične za zaporedje.
Povzetek – Kromosomski trakovi v primerjavi s poslikavo kromosomov
Povezovanje kromosomov in slikanje kromosomov sta dve tehniki, ki se uporabljata za vizualizacijo kromosomov, običajno v metafazi. Obe tehniki pomagata prepoznati numerične in strukturne kromosomske aberacije ter genetske bolezni. Kromosomski trakovi so tehnika barvanja, ki prikazuje specifične regije kromosomov v temnih in svetlih trakovih, ki se razlikujejo. Medtem je kromosomsko slikanje vrsta hibridizacijske tehnike, ki vizualizira specifične regije kromosomov zaradi hibridizacije s fluorescentno označenimi sondami, specifičnimi za zaporedje. To je torej ključna razlika med vezanjem kromosomov in slikanjem kromosomov.
