Ključna razlika – imunocitokemija proti imunohistokemiji
Imunocitokemija (ICC) in imunohistokemija (IHC) sta dve široko uporabljeni tehniki v molekularni diagnostiki, ki identificirata in potrjujeta pojav nenalezljivih in nalezljivih bolezni na podlagi molekularnih markerjev, prisotnih na celicah. Ključna razlika med imunocitokemijo in imunohistokemijo je molekula, ki se uporablja kot postopek analize v teh tehnikah. Pri ICC se uporabljajo primarna in sekundarna protitelesa, konjugirana z markerji, kot je fluorescenca, medtem ko se za diagnostične določitve uporabljajo IHC, monoklonska in poliklonska protitelesa.
Kaj je imunocitokemija (ICC)?
ICC uporablja primarna in sekundarna protitelesa, vezana na označevalce, kot so fluorescenčni označevalci ali encimi, in je zmogljiva detekcijska metoda za odkrivanje antigenov, prisotnih na ciljnih celicah, ki so lahko nalezljivi celični delci ali rakave tumorske celice. Za imunocitokemijo so potrebne tri vrste kontrol.
- Primarno protitelo – kontrola, ki pokaže specifičnost vezave primarnega protitelesa na antigen
- Sekundarno protitelo – kontrola, ki kaže, da je oznaka specifična za primarno protitelo
- Kontrole oznak – pokažite, da je označevanje rezultat dodane oznake in ne rezultat endogenega označevanja.
Slika 01: Imunocitokemija označuje posamezne proteine znotraj celic (tukaj je tirozin hidroksilaza v aksonih simpatičnih avtonomnih nevronov prikazana zeleno).
Primarna kontrola protiteles je specifična za vsako novo protitelo in je ni mogoče ponoviti za vsak poskus. Sekundarna kontrola protiteles je zasnovana na podlagi primarnega protitelesa, uporabljenega v poskusu, in je vključena v vsak poskus. Nadzor označevanja je vključen, če se spremeni pogoj postopka, vzorec spremeni ali ko se odkrije nepričakovano označevanje.
Dve glavni uporabi ICC sta radioimunski test (RIA) in encimski imunosorbentni test (ELISA). Najpogosteje uporabljeno protitelo je imunoglobulin G.
Kaj je imunohistokemija (IHC)?
V imunohistokemiji izvorni vzorec vsebuje monoklonska in poliklonska protitelesa za ugotavljanje prisotnosti antigenov v tujih celicah. Ta tehnika temelji na specifični reakciji vezave antigen-protitelo. Protitelesa, uporabljena pri odkrivanju, je mogoče označiti z različnimi markerji; lahko so fluorescenčni markerji, radioaktivno označeni markerji ali kemični markerji. Z omogočanjem in vitro vezave med antigenom in tarčnim protitelesom je mogoče določiti prisotnost ali odsotnost določenega proteina v celici.
Slika 02: Imunohistokemično obarvanje normalne ledvice s CD10
Trenutno se znanstveniki ukvarjajo z razvojem ciljnih protiteles za specifične antigene, prisotne v celicah, ki se lahko razvijejo kot maligne tumorske celice ali antigene, prisotne v povzročiteljih okužb, kot je HIV.
Kakšne so podobnosti med imunocitokemijo in imunohistokemijo?
- Reakcije so zelo specifične in natančne pri ICC in IHC.
- Aplikacije ICC in IHC vključujejo diagnostiko raka in nalezljivih bolezni.
- V obeh pogojih je treba vzdrževati sterilne pogoje in izvajati jih je treba in vitro
- Obe tehniki zagotavljata ponovljive rezultate.
- Obe sta hitri.
- Radijsko označevanje, fluorescenčne tehnike se uporabljajo kot detekcijske metode v ICC in IHC.
- Oba temeljita na združevanju antigen-protitelo.
Kakšna je razlika med imunocitokemijo in imunohistokemijo?
Imunocitokemija (ICC) proti imunohistokemiji (IHC) |
|
| ICC uporablja primarne in sekundarne označevalce, vezane na protitelesa, kot so fluorescentni označevalci ali encimi, in je zmogljiva detekcijska metoda za odkrivanje antigenov, prisotnih na ciljnih celicah. | IHC je metoda, ki uporablja monoklonska in poliklonska protitelesa za ugotavljanje prisotnosti antigenov, ki so posebni proteinski označevalci, nameščeni na celičnih površinah. |
| Vir vzorca | |
| Vzorci, pridobljeni iz tkiv, ki so bila histološko obdelana v tanke reze, se uporabljajo v ICC. | IHC uporablja vzorce, sestavljene iz celic, gojenih v enoslojni plasti, ali celic v suspenziji, ki so odložene na objektno stekelce. |
| Obdelava vzorcev | |
| Pri ICC morajo biti celice prepustne, da olajšajo prodor protiteles do znotrajceličnih tarč. | Pri IHC so celice pred barvanjem fiksirane s formalinom, vstavljene v parafin. |
Povzetek – Imunocitokemija proti imunohistokemiji
Molekularna diagnostika se uporablja za identifikacijo in potrditev pojava tako nenalezljivih kot nalezljivih bolezni na podlagi molekularnih markerjev, ki so prisotni na celicah. Molekularni markerji so lahko proteini ali zaporedja DNA ali RNA; razvoj tehnologij, kot sta ICC in IHC, je znanstvenikom utrl pot do prepoznavanja bolezni in njenega vzroka v zgodnji fazi. Tako ICC kot IHC sta odvisna od specifičnih reakcij med protitelesom in antigenom, čeprav je vir vzorca. Glavna razlika med imunocitokemijo in imunohistokemijo je obdelava vzorcev pri obeh postopkih.
Prenesite PDF različico Immunocytochemistry vs Immunohistochemistry
Lahko prenesete PDF različico tega članka in jo uporabite za namene brez povezave v skladu z opombo o citiranju. Prenesite PDF različico tukaj. Razlika med imunocitokemijo in imunohistokemijo.
