Kislinsko odporne v primerjavi z nekislinsko odpornimi bakterijami
Razlika med kislinsko odpornimi in nekislinsko odpornimi bakterijami je v bistvu v njihovi celični steni. Bakterije na splošno identificiramo in opazujemo s postopki diferencialnega barvanja. Kislinsko obstojno barvanje je ena od takih metod za razlikovanje določene vrste bakterij od drugih. To metodo sta prva odkrila Franz Ziehl in Friedrich Neelsen. Takrat Mycobacterium, ki povzroča tuberkulozo, ni bilo mogoče obarvati in opazovati z drugimi postopki obarvanja, kot je barvanje po Gramu. Neelsen in Ziehl sta to bakterijo obarvala z dodajanjem fenola (karbolne kisline) in bazičnega fuksina (e) skupaj s kislim alkoholom, zato je barvilo znano kot raztopina Carbol Fuchsin (e) ali madež Ziehl – Neelsen.
Postopek kislinsko hitrega obarvanja
Da bi dokončali razumevanje kislinsko odpornih in nekislinsko odpornih bakterij, bomo najprej šli skozi postopek barvanja. Kislinska obstojnost je lastnost bakterije, ki je odporna na razbarvanje s kislinami ali kislimi alkoholi med postopkom obarvanja. To je prvotno opisal Paul Ehrlich. Med postopkom obarvanja se izvedejo naslednji trije koraki.
1. Nanos primarnega barvila – Carbolfuchsin je primarna matrica, ki se nanese na razmaz bakterij, ki je toplotno fiksiran na čistem objektnem stekelcu. Toplota se uporablja za zagotovitev prodiranja barvila v citoplazmo.
2. Razbarvanje – kislinsko-alkoholna obdelava za odstranitev primarnega barvila.
3. Protibarvanje – za ogled brezbarvnih bakterij se uporabi metilensko modro.
Kaj so kislinsko odporne bakterije?
Bakterije, ki so odporne na kisline, so znane kot bakterije, odporne na kisline. Z drugimi besedami, bakterije, ki so še vedno rdeče obarvane po koraku razbarvanja med postopkom kislinsko obstojnega obarvanja, so znane kot kislinsko obstojne bakterije. Zakaj so te bakterije odporne na kislino? No, če razmislimo o prerezu celične stene kislinsko odporne bakterije, je to zlahka razumljivo.
Acid obstojno barvanje (ali karbolfuksin) se veže samo na bakterije, ki imajo voskasto celično steno. Ta celična stena vsebuje hidrofobni voskast lipid, znan kot mikolna kislina, ki zavzema 60 % celične stene. Zaradi hidrofobne lastnosti je vodotopnim snovem preprečen vstop v citoplazmo. Zato te bakterije ni mogoče obarvati z vodotopnimi barvili, kot je metilensko modro. Karbolfuksin je sestavljen iz fenola in fuksina, tako da lahko prodre do citoplazme.
Med korakom razbarvanja s kislinskim alkoholom je zaradi prisotnosti hidrofobne mikolne kisline kislinski alkohol preprečen vstop v citoplazmo, zato ne more odstraniti karbolfuksina iz bakterijske celice. Tako bo primarno barvilo ostalo v citoplazmi tudi po koraku razbarvanja.
Kislinsko odporne bakterije vključujejo več rodov, kot sta Mycobacterium in Nocardia, ki so patogeni za človeka in povzročajo tuberkulozo oziroma nokardiozo.
Acid Fast Bacteria je v rdeči barvi
Kaj so bakterije, ki niso kislinsko odporne?
Če bakterija nima kislinsko obstojne, se imenuje kisloodporna bakterija. Po obarvanju s kislinsko hitrim obarvanjem se te bakterije obarvajo modro. To je zato, ker imajo bakterije, ki niso hitre za kisline, tanko celično steno in nimajo mikolne kisline v celični steni. To omogoča prodiranje karbolfuksina v citoplazmo. Vendar pa se odstrani z obdelavo s kislim alkoholom, zaradi česar postanejo nekisloodporne bakterijske celice brezbarvne. Za jasno opazovanje in razlikovanje od kisloodpornih bakterij bo tu koristno metilensko modro.
Bakterije, ki niso hitre za kisline, se lahko obarvajo z barvanjem po Gramu ali katerim koli drugim preprostim postopkom barvanja. Primeri nekislih hitrih bakterij so Escherichia coli, Pseudomonas sp.
Nekislinsko odporne bakterije so v modri barvi
Kakšna je razlika med kislinsko odpornimi in nekislinsko odpornimi bakterijami?
Kislinska obstojnost:
• Kisloodporne bakterije kažejo kislinsko obstojne.
• Bakterije, ki niso odporne na kisline, niso odporne na kisline.
Celična stena:
• Kisloodporne bakterije vsebujejo debelo celično steno s plastjo mikolne kisline.
• Kisloodpornim bakterijam manjka ta plast.
Madež po Gramu:
• Kisloodporne bakterije je težje obarvati z barvanjem po gramu.
• Kislinsko neodporne bakterije je mogoče obarvati z barvanjem po Gramu.
Patogeni ali nepatogeni:
• Večina kislinsko odpornih bakterij je patogenih.
• Kislinsko neodporne bakterije so lahko patogene ali nepatogene.
Bacili ali koki:
• Kisloodporne bakterije so večinoma bacili.
• Kislinsko neodporne bakterije so lahko bacili ali koki.
