Ključna razlika med Pour plate in Spread plate je, da se znana prostornina vzorca razporedi po površini agarnega medija v namazani plošči, medtem ko se pri izlivni plošči znana prostornina vzorca zmeša z agarja in nato vlijemo v krožnik. Če primerjamo natančnost teh dveh tehnik, ima plošča za izlivanje večjo natančnost kot plošča za širjenje.
Metoda standardnega štetja na ploščah je pristop, ki temelji na rasti in šteje število živih (rastočih/primernih/sposobnih za preživetje) mikroorganizmov v vzorcu. Je močna metoda, ki se uporablja na številnih mikrobioloških področjih za analizo števila živih mikroorganizmov. Področja, kot so hrana in mlečni izdelki, medicina, okolje, voda in kmetijstvo, mikrobna genetika, molekularna mikrobiologija, razvoj rastnih medijev in biotehnologija (bioreaktorska tehnologija, fermentacija, čiščenje odpadkov/odpadne vode itd.) uporabljajo to tehniko. Poleg tega obstajata dva glavna načina za izvedbo standardnega štetja plošč: to sta tehnika razpršene plošče in tehnika polivanja plošče.
Kaj je Pour Plate?
Tehnika nalivne plošče je mikrobna metoda za štetje nekaterih živih celic, prisotnih v vzorcu. Posebnost metode pour plate je, da se znana prostornina vzorca najprej zmeša z agarjem in nato vlije v ploščo.
Slika 01: Plošča za izlivanje
Drugi koraki so podobni tehniki razpršene plošče, opisani v naslednjem razdelku. Naslednji korak po vlivanju agarja, pomešanega z vzorcem, je, da se ta strdi in inkubira. Po inkubaciji je za izračun končne CFU za 1 g ali 1 ml bistvenega pomena štetje števila sposobnih kolonij.
Kaj je Spread Plate?
Spread plate je tehnika za štetje živih celic v vzorcu. Pri tej tehniki je za vzorec potrebno serijsko redčenje, da se zagotovi, da vsaj ena povzroči štetno število kolonij. Postopek tukaj je, da s pipeto nastavite določeno količino razredčitve na površino plošče z agarjem in jo hitro in enakomerno porazdelite po površini agarja s steklenim trosilnikom, ki je bil sežgan in ohlajen v alkoholu. Izvajanje ponovitev je potrebno za pridobitev zanesljive srednje vrednosti. Naslednji korak je, da te plošče za kratek čas posušite, nato pa jih obrnete in postavite v inkubator na primerno temperaturo za rast in za nastavljeno inkubacijsko dobo.
Slika 02: Plošča za širjenje
Po inkubaciji bo pregled plošč pokazal rast. Pri eni ali več razredčitvah bo število celic, prisotnih v inokulantih (npr. 100 ali 200 μl), povzročilo med 30 in 300 diskretnih kolonij na površini agarja. Štetje manj kot 30 kolonij je statistično nezanesljivo. Število nad 300 je težko našteti in je nagnjeno k napakam.
Kakšne so podobnosti med ploščo za nalivanje in ploščo za razmazanje?
- Razširjena plošča in prelivna plošča sta dve tehniki za pridobivanje števila živih celic, prisotnih v vzorcu.
- Obe sta neposredni metodi.
- Do napak pri vzorčenju lahko pride pri obeh metodah.
- Omejitve pogojev rasti vplivajo na rezultat obeh metod.
- Tudi tehnične napake lahko vplivajo na končni rezultat obeh metod.
- Čeprav sta obe metodi izvedljivi, se ne uporabljata za gojenje bakterij, ki jih ni mogoče gojiti.
Kakšna je razlika med ploščo za nalivanje in ploščo za razmazanje?
Pour plate je mikrobna tehnika za štetje števila živih celic v vzorcu. Tehnika razpršene plošče je še ena tehnika za štetje bakterij, ki rastejo na površini medija. Pri tehniki izlivne plošče je postopek dodajanje vzorca na površino strjenega medija na izlivni plošči. Toda pri tehniki spred plošče je postopek mešanje vzorca s staljenim agarjem in nato vlivanje v ploščo.
Glede natančnosti teh dveh tehnik ima plošča za izlivanje višjo natančnost kot plošča za širjenje. Poleg tega se za razliko od plošče za izlivanje uporablja steklen trosilnik za enakomerno porazdelitev vzorca po površini plošče za razmazanje. Nadalje je z uporabo plošče za izlivanje mogoče našteti aerobe, anaerobe in fakultativne anaerobe. Vendar pa je z uporabo razpršene plošče možno le našteti aerobe. Poleg tega so plošče s strjenim agarjem potrebne za izvedbo plošče za širjenje, medtem ko so za metodo prelivanja potrebni mediji s tekočim staljenim agarjem.
Povzetek – krožnik za nalivanje v primerjavi s krožnikom za širjenje
Pour plate in Spread plate sta dve tehniki v mikrobiologiji za lažje štetje mikrobnih celic v vzorcu. Obe metodi temeljita na rasti, zato merite žive celice. Med prelivno ploščo se znana prostornina vzorca zmeša s staljenim agarjem in vlije v ploščo. Med ploščo za širjenje se znana prostornina razporedi po površini strjenega agarnega medija. To je razlika med ploščo za nalivanje in ploščo za širjenje.
