Ključna razlika med skupnim številom celic in številom živih celic je, da skupno število celic oceni vse celice, vključno z živimi in mrtvimi mikrobnimi celicami v vzorcu, medtem ko število živih celic oceni le žive mikrobne celice v vzorcu.
Štetje števila organizmov v populaciji velja za nujno za večino eksperimentalnega dela. Zato poskušamo analizirati število mikrobov v vzorcu z neposrednimi in posrednimi metodami. Neposredne meritve vključujejo metode, ki neposredno štejejo število celic. Posredne meritve vključujejo merjenje nekaterih parametrov, ki jih je mogoče povezati s številom celic, kot so gostota celic, suha teža itd. Nekatere metode kvantificirajo le žive mikrobne celice v vzorcu. Ena taka metoda je štetje živih celic. Neposredno mikroskopsko štetje kvantificira vse celice v znani prostornini medija/vzorca z uporabo mikroskopa. Zato šteje tako žive kot odmrle celice. Je vrsta skupnega števila celic.
Kaj je skupno število celic?
Celotno število celic je metoda, ki vključuje štetje vseh celic v znani prostornini medija/vzorca z uporabo mikroskopa in štetne komore (hemocitometer). Za razliko od štetja živih celic se štejejo žive in odmrle celice. Zato je to skupno število, razen če se med opazovanjem nanese barvilo za sposobnost preživetja. Pri mikroskopiji celice opazujemo neposredno pod mikroskopom in jih preštejemo. Uporablja celično suspenzijo, ki je sestavljena iz mikrobnih celic. Za lažje štetje in natančne meritve lahko vzorec razredčite. Pri zelo visokih/nizkih koncentracijah celic je pridobivanje celotnega števila celic z uporabo mikroskopa težka naloga.
Slika 01: Komora za štetje – hemocitometer
Komore za štetje so preproste, poceni in hitre za skupno štetje celic. Najpomembneje je, da so števne komore uporabne za štetje tako evkariontov kot prokariontov. Celice preštejemo v izbranih kvadratih z znano prostornino, da kvantificiramo skupno število celic.
Kaj je število živih celic?
Število živih celic je metoda štetja živih mikrobnih celic v vzorcu. V vzorcu šteje samo žive celice. Štetje živih plošč, membranska filtracija in najverjetneje število je nekaj tehnik štetja živih celic. Ti pristopi temeljijo na rasti. Metoda štetja živih ploščic je močna metoda, ki se uporablja na številnih mikrobioloških področjih, vključno z mikrobiologijo hrane in mleka, medicinsko mikrobiologijo, okoljsko mikrobiologijo, mikrobno genetiko, razvojem rastnih medijev in biotehnologijo.
Najpogostejši način za štetje sposobnih bakterij je uporaba vzorca, ki lahko tvori kolonije na agarskem gojišču. Obstajata dva glavna načina izvajanja štetja krožnikov: tehnika razpršenih krožnikov in tehnika polivanja krožnikov. Znano količino vzorca lahko razporedite po površini plošče z agarjem ali vmešate v agar. Ploščo nato inkubiramo in nastale kolonije preštejemo. Število kolonij je povezano s številom mikroorganizmov v prvotnem vzorcu. Število sposobnih za preživetje meri samo tiste celice, ki so žive in rastejo.
Slika 02: Število sposobnih plošč
Najverjetnejša številka (MPN) je alternativa metodam štetja plošč za oceno gostote populacije živih celic. Šteje organizme, ki rastejo v tekoči kulturi, in je zato pretežno bakteriološka tehnika. Še posebej je uporaben pri nizkih koncentracijah organizmov, npr. mleko, pitna voda.
Membranska filtracijska tehnika je primernejša, ko so mikrobi zelo razredčeni, kot v mestnem vodovodu. Izvede se preprosto tako, da znano količino tekočine spustimo skozi filter in jo inkubiramo na hranilnem mediju. Preštejejo se kolonije, ki se razvijejo na filtru, in izračuna število bakterij na mililiter vzorca.
Kakšne so podobnosti med skupnim številom celic in številom živih celic?
- Skupno število celic in število živih celic sta dve vrsti mikrobnih tehnik, ki kvantificirata celice.
- So pogosto uporabljene tehnike štetja v mikrobioloških laboratorijih.
Kakšna je razlika med skupnim številom celic in številom živih celic?
Skupno število celic našteje vse žive in odmrle mikrobne celice v vzorcu. Nasprotno pa število živih celic našteje samo žive celice v vzorcu. Torej, to je ključna razlika med skupnim številom celic in številom živih celic. Skupno število celic je neodvisno od rasti kolonij na agarskih ploščah, medtem ko je število živih celic tehnika, ki temelji na rasti in je odvisna od rasti mikrobnih kolonij na agarskih ploščah.
Spodnja info-grafika povzema razliko med skupnim številom celic in številom živih celic.
Povzetek – Skupno število celic v primerjavi s številom sposobnih celic
Skupno število celic našteje žive in mrtve mikrobne celice, medtem ko število živih celic našteje samo žive celice. To je torej ključna razlika med skupnim številom celic in številom živih celic. Poleg tega je število živih celic tehnika, ki temelji na rasti, za razliko od skupnega števila celic. Poleg tega zahteva inkubacijo plošč, dokler ne dobimo vidnih kolonij. Štetje živih plošč, MPN in membranska filtracija so le nekatere tehnike štetja živih celic, medtem ko sta neposredna mikroskopija in uporaba hemocitometra dve tehniki celotnega števila celic.
