Ključna razlika med barvanjem po Giemsi in barvanjem po Leishmanu je v tem, da je barvanje po Giemsi uporabno pri barvanju regij DNK različnih kromosomov za raziskovanje različnih aberacij, kot so translokacije in prerazporeditve, medtem ko je barvanje po Leishmanu uporabno pri barvanju in analizi krvnega razmaza za razlikovanje in identifikacijo tripanosomov, levkocitov in parazitov malarije.
Barvanje je bistven korak med izboljšanjem kontrasta mikroskopske slike v kontekstu mikroskopije, zlasti za poudarjanje različnih struktur v bioloških celicah in tkivih. Barvanje po Giemsi in barvanje po Leishmanu spadata v skupino madežev po Romanowskyju, kamor spadata tudi Wrightov in Jennerjev madež. Običajno so barve po Romanowskyu uporabne pri barvanju krvnih razmazov. To večinoma uporabljamo med preučevanjem morfologije rdečih krvnih celic in učinkovitosti diferencialne bele krvne slike. Eozin Y in azurno B barvili sta običajni komponenti za barvanje po Romanowskyju. Postopki barvanja po Romanowskemu pomagajo pri diagnozi različnih bolezni, kot je levkemija.
Kaj je Giemsa Stain?
Barva po Giemsi običajno pomaga razlikovati med citoplazmatsko in jedrsko morfologijo krvnih celic, kot so bele krvne celice, rdeče krvne celice in trombociti. Pomaga tudi pri razlikovanju parazitov. Uporablja se predvsem za citogenetiko ter pri diagnostiki malarije in drugih parazitskih bolezni. Poleg tega je barvanje po Giemsi specifično za fosfatne skupine, ki so prisotne v DNK. Prilepijo se na področja, kjer je v verigi DNK večje število vezi adenin-timin.
Slika 01: Madež Giemsa
Poleg tega je barvanje po Giemsi uporabno tudi pri pasovih po Giemsi ali G za barvanje kromosomov in ustvarjanje kariogramov. Zato lahko barvanje po Giemsi identificira in vizualizira različne nepravilnosti v kromosomih. Na primer, trofozoit Trichomonas vaginalis, ki daje zelenkast izcedek in je sestavljen iz gibljivih celic na mokrih preparatih, obarvamo z barvilom po Giemsi. Kot je navedeno zgoraj, madež Giemsa deluje kot tipičen madež krvnega filma. Pri barvanju se rdeče krvne celice obarvajo rožnato, trombociti obarvajo svetlo ali bledo rožnato, citoplazma limfocitov, monocitov in levkocitov pa se obarva nebesno modro, bledo modro in magenta.
Giemsa barvanje je mešanica eozina, metilen modrega in azure B. Mešanica metilen azura, ki skupaj z metilen modrim tvori eozinat, stabilizira to mešanico. Pri postopku barvanja po Giemsi se na mikroskopsko stekelce najprej namesti tanek film vzorca. Naslednji korak je približno 30-sekundno fiksiranje s čistim metanolom z dodajanjem nekaj kapljic metanola na stekelce. Nato predmetno stekelce za približno 20-30 minut potopimo v 5-odstotno raztopino za barvanje Giemsa. Zadnji korak je pranje stekelca z vodo iz pipe in pustite, da se posuši.
Kaj je Leishman Stain?
Škotski patolog William Boog Leishman je razvil Leishmanovo barvanje. Je eden od madežev, ki spadajo v skupino madežev Romanowsky. Poleg tega se pogosteje uporablja pri diferenciaciji in identifikaciji različnih malarijskih parazitov, tripanosomov – enoceličnih praživali z bički, ki so parazitski in levkociti.
Slika 02: Leishmanov madež
Osnova Leishmanovega barvanja je metanolna mešanica, ki vsebuje mešanico metilen modrega, ki je "polikromirano"; demetiliran v različne vrste azurov in eozina. Zaradi stabilnosti osnovne raztopine metanolne zmesi jo lahko uporabimo neposredno za fiksiranje razmaza, pri čemer odpravimo korak predfiksiranja. Stabilnost se zmanjša, če raztopino pomešamo z vodnim pufrom. Pri diferencialnem štetju celic Leishmanovo barvanje zagotavlja značilno svetlo vijolično barvo jedra in zrnc nevtrofilcev. Tako poveča razlikovanje med jedrom in citoplazmo. Prav tako Leishmanovo barvanje zagotavlja bolj kakovostno kontrastno barvanje v primerjavi z drugimi barvili na osnovi metilen modrega in eozina.
Ker so različne citoplazemske komponente ostro obravnavane za diferenciacijo in identifikacijo, imajo hematologi raje barvanje po Leishmanu v primerjavi z drugimi barvanjem po Romanowskyju. Pri odkrivanju malarijskih parazitov so postopki barvanja po Leishmanu bolj občutljivi in natančni od drugih barvil, kot je Fieldov madež.
Kakšne so podobnosti med barvanjem Giemsa in Leishmanovim barvanjem?
- Giemsa in Leishmanov madež sta različna madeža.
- Oboje je uporabno pri izvajanju diferencialne levkocitne slike in preučevanju celične morfologije rdečih krvnih celic.
- Poleg tega oba madeža spadata v skupino madežev Romanowsky.
Kakšna je razlika med barvanjem Giemsa in Leishmanovim barvanjem?
Barvanje po Giemsi je uporabno pri barvanju regij DNA različnih kromosomov za raziskovanje različnih aberacij, kot so translokacije in preureditve, medtem ko je barvanje po Leishmanu uporabno pri barvanju krvi za razlikovanje in identifikacijo tripanosomov, levkocitov in parazitov malarije. Torej, to je ključna razlika med madežem po Giemsi in madežem po Leishmanu.
Poleg tega je bakteriolog Gustav Giemsa razvil tehniko barvanja po Giemsi, medtem ko je patolog William Boog Leishman razvil tehniko barvanja po Leishmanu. Poleg tega je druga pomembna razlika med madežem po Giemsi in madežem po Leishmanu sestava madeža. Barvanje po Giemsi je mešanica eozina, metilen modrega in Azure B, medtem ko je barvanje po Leishmanu metanolna zmes, ki vsebuje mešanico metilen modrega.
Povzetek – Giemsa Stain proti Leishman Stain
V kontekstu mikroskopije imajo tehnike barvanja pomembno vlogo pri izboljšanju kontrasta mikroskopskih slik različnih bioloških tkiv. Barvanje po Giemsi je uporabno pri barvanju regij DNK različnih kromosomov za raziskovanje različnih aberacij, kot so translokacije in preureditve. Leishmanovo barvanje je uporabno pri barvanju in analizi krvnega razmaza za razlikovanje in identifikacijo tripanosomov, levkocitov in parazitov malarije. Torej, to je razlika med barvanjem po Giemsi in barvanjem po Leishmanu.
