Ključna razlika – TLC proti HPTLC
TLC in HPTLC sta dve kemijski tehniki, ki se uporabljata za ločevanje nehlapnih komponent v mešanici. Ključna razlika med TLC in HPTLC je, da ima vpojni material v plošči TLC velike delce, medtem ko imajo plošče HPTLC zelo majhne delce adsorbtivnega materiala.
TLC je tankoplastna kromatografija. HPTLC je tankoplastna kromatografija visoke ločljivosti, ki je napredna tehnika v primerjavi z metodo TLC.
Kaj je TLC?
TLC ali tankoplastna kromatografija je osnovna kemijska tehnika, ki se uporablja za ločevanje nehlapnih komponent v mešanici. Ta poskus se izvede z uporabo steklenih, plastičnih ali papirnih listov. Ta plošča je prevlečena s tanko plastjo celuloze ali silikagela (vpojni material). Ta tanka plast je znana kot stacionarna faza TLC. Plošča je znana kot plošča TLC.
Pred poskusom sta osnovna in zgornja črta označeni s svinčnikom na plošči TLC. Nato se vzorec nanese vzdolž te črte s kapilarno cevko. Nato se TLC plošča postavi navpično v mobilno fazo. Mobilna faza je topilo (ali mešanica topil), postavljeno v posodo. Ko postavite ploščo TLC v to mobilno fazo, morate ohraniti osnovno črto nad robom topila. V nasprotnem primeru bo vzorec raztopljen v topilu.
TLC plošča lahko nekaj časa ostane v mobilni fazi. Nato se sčasoma mobilna faza dvigne navzgor po plošči zaradi kapilarnega delovanja. Če je vzorec topen v mobilni fazi, se bo dvignil navzgor skupaj z mobilno fazo.
Za to metodo TLC stoji načelo »podobno se raztopi podobno«. To pomeni, da se polarne spojine raztopijo v polarnih topilih, medtem ko se nepolarne spojine raztopijo v nepolarnih topilih. Stacionarna faza je običajno silikagel ali celuloza, ki je polarna spojina. Uporabljena mobilna faza je nepolarno topilo, kot je heksan. Če torej vzorec vsebuje kakršne koli nepolarne komponente, bodo te komponente migrirale navzgor skupaj z mobilno fazo. Polar komponente se bodo prilepile na ploščo. Med gibljivimi komponentami bodo zmerno nepolarne spojine migrirale počasi, medtem ko bodo zelo nepolarne spojine migrirale hitro. Ko fronta topila doseže zgornjo črto plošče TLC, ploščo vzamemo ven in pustimo, da se posuši.
Slika 01: Tehnika TLC
Če so bile komponente v vzorcu obarvane spojine, bi morale biti na plošči na različnih mestih pisane lise. Če pa so bile komponente brezbarvne, je treba uporabiti druge tehnike; na primer pršenje ninhidrina za odkrivanje amoniaka ali aminov (primarni amini in sekundarni amini).
Kaj je HPTLC?
HPTLC ali tankoplastna kromatografija visoke ločljivosti je napredna oblika tankoplastne kromatografije (TLC). Ločljivost in natančnost HPTLC sta zelo visoki. Večino korakov te tehnike je mogoče avtomatizirati.
Plošče, ki se uporabljajo pri HPTLC, vsebujejo zelo majhne delce silikagela, gostota pakiranja gela na plošči pa je visoka. Površina plošče je gladka in omogoča učinkovito ločevanje. Analiza je hitrejša od tehnike TLC. Tudi občutljivost te metode je visoka. Pri HPTLC je več različnih vzorcev mogoče ločiti na isti plošči brez kakršnega koli koraka priprave vzorca.
Kakšna je razlika med TLC in HPTLC?
TLC proti HPTLC |
|
TLC je tankoplastna kromatografija. | HPTLC je tankoplastna kromatografija visoke ločljivosti. |
Tehnika | |
Je osnovna kemijska tehnika, ki se uporablja za ločevanje nehlapnih komponent v mešanici. | Je napredna oblika tankoplastne kromatografije (TLC). |
Krožnik | |
PLOŠČA TLC je lahko narejena iz papirja, plastike ali stekla, na katero je nanesen vpojni material z velikimi delci. | HPTLC plošče imajo zelo majhne delce vpojnega materiala. |
Ločljivost | |
Metoda TLC daje slabo ločljivost, če ima vzorec komponente s podobnimi lastnostmi. | Metoda HPTLC daje visoko ločljivost. |
Ura | |
Tehnika TLC je zamudna tehnika. | HPTLC daje rezultate pri višji hitrosti kot metoda TLC. |
Povzetek – TLC proti HPTLC
HPTLC je napredna oblika TLC. Ključna razlika med TLC in HPTLC je v tem, da je plošča TLC lahko izdelana iz papirja, plastike ali stekla, na katero je nanesen vpojni material z velikimi delci, medtem ko imajo plošče HPTLC zelo majhne delce vpojnega materiala.