Ključna razlika – DMEM proti EMEM
Gojitev živalskih celic se izvaja za vzdrževanje živalskih celičnih linij za izvajanje številnih raziskovalnih dejavnosti. Živalske celične linije vzdržujemo v sterilnih pogojih in zahtevajo posebne tehnike. Uporabljajo se v študijah v zvezi s proizvodnjo cepiv, za ugotavljanje obnašanja celice do rakotvornih in mutagenih snovi ter pri raziskavah raka. Gojišča celične kulture so zelo pomembna za uspeh gojenja živalskih celic. Obstajajo različne vrste gojišč za celične kulture, kot sta Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) in Eagle's Minimum Essential Medium (EMEM). DMEM je modificiran bazalni medij s povečano koncentracijo aminokislin in vitaminov do štirikrat. To vključuje tudi nekatere druge nadomestke, ki povečajo hranilne pogoje gojišča. EMEM je ena od prvih vrst gojišč za živalske celične kulture, ki jih je razvil Harry Eagle. Je preprost, bazalni medij z minimalnimi količinami hranilnih sestavkov. Ključna razlika med dvema medijema je sestava hranil. EMEM je sestavljen iz minimalnih koncentracij hranil, potrebnih za rast kulture, medtem ko je DMEM zelo zapleten medij s povečanimi koncentracijami aminokislin in vitaminov.
Kaj je DMEM?
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM) je vrsta modificiranega medija, ki se komercialno pripravlja kot kremasto bel prah. To je prilagojeno iz EMEM, sestava hranil pa je spremenjena s povečanjem koncentracije aminokislin in vitaminov. Koncentracija aminokislin se poveča do dvakrat v primerjavi z bazalnim medijem. Koncentracija vitaminov se poveča do štirikrat, s čimer se poveča vsebnost hranilnih snovi v mediju.
DMEM je prav tako spremenjen z dodajanjem več soli, kot so železov nitrat, natrijev piruvat in nekatere neesencialne aminokisline, kot sta serin in glicin. Spremenjena je tudi koncentracija glukoze v mediju. Prvotna formulacija je sestavljena iz 1000 mg/L glukoze, medtem ko je v DMEM koncentracija povečana na 4500 mg/L. DMEM zahteva tudi dodatek serumskega medija, saj ni popoln medij. Najpogosteje je DMEM dopolnjen s fetalnim govejim serumom (FBS). FBS zagotavlja potrebne beljakovine in rastne faktorje za proces gojenja.
PH medija se spreminja z dodatkom natrijevega bikarbonata. pH medija pred dodajanjem natrijevega bikarbonata je okoli 6,80 – 7,40, medtem ko je pH po dodajanju natrijevega bikarbonata v območju 7,60 – 8,20. Temperatura shranjevanja medija je 2 – 8 0C.
Slika 01: DMEM
Aplikacije DMEM
- Za preučevanje sposobnosti poliomavirusa za tvorbo plakov v mišjih embrionalnih celicah.
- V študijah inhibicije kontakta
- V piščančjih celičnih kulturah
Kaj je EMEM?
Eagle's Minimum Essential Medium (EMEM) je eden od prvih razvitih gojišč pri gojenju celic živalskih celičnih linij. Prve vrste živalskih celičnih linij, vzgojenih z uporabo EMEM, vključujejo mišje celice L in celice HeLa. Tudi medij EMEM je vrsta modificiranega medija. Harry Eagle je prvi oblikoval medij EMEM. Mediji EMEM so vključevali esencialne aminokisline in vitamine v minimalni koncentraciji, ki jo zahtevajo vrste celic. Neesencialne aminokisline niso bile vključene v formulacijo, koncentraciji glukoze in natrijevega bikarbonata pa sta zmanjšani. Čeprav so mediji vsebovali uravnoteženo količino minimalnih zahtev za rast za uspešno rast celic.
EMEM ni popoln medij. Zato je za uspešno rast celic sesalcev potrebna dopolnitev s serumom. EMEM se uporablja na najrazličnejših celicah in je še vedno priljubljen medij med raziskovalci celičnih kultur.
Kakšne so podobnosti med DMEM in EMEM?
- Obe vrsti medija se uporabljata v kulturi živalskih celic.
- Obe vrsti medija sta tekoči formulaciji.
- Obe vrsti medija sta modificirana medija iz bazalnega medija.
- Obe vrsti medija vsebujeta esencialne aminokisline, vitamine in anorganske soli, ki so potrebne za rast.
- Obe vrsti medija sta nepopolni. Zato je treba dodati serum.
- Obe vrsti medija kot vir ogljika uporabljata glukozo.
- Obe vrsti medija imata višji pH in se uravnava z dodatkom natrijevega bikarbonata.
Kakšna je razlika med DMEM in EMEM?
DMEM proti EMEM |
|
| DMEM je modificirana vrsta bazalnega medija s povečano koncentracijo aminokislin in vitaminov. To vključuje tudi nekaj več nadomestkov, ki povečajo hranilne pogoje gojišča. | EMEM je ena od prvih vrst gojišč za gojenje živalskih celic, ki jih je razvil Harry Eagle. Je preprosto, bazalno gojišče z minimalnimi količinami hranil. |
| Modifikacije aminokislin | |
| Koncentracija aminokislin se je v mediju DMEM povečala do dvakrat. | V EMEM se uporablja minimalna koncentracija aminokislin. |
| Modifikacije vitaminov | |
| Koncentracija vitaminov se je v DMEM povečala do štirikrat. | V EMEM se uporablja minimalna koncentracija vitaminov. |
| Koncentracija glukoze | |
| Koncentracija glukoze se je v DMEM povečala do 4500 mg/L. | Koncentracija glukoze je 1000 mg/L v EMEM. |
| Prisotnost neesencialnih aminokislin | |
| Prisoten v DMEM. | Odsoten v EMEM. |
| Prisotnost dodatnih komponent | |
| Komponente, kot sta železov nitrat in natrijev piruvat, so prisotne v DMEM. | EMEM vsebuje minimalno količino hranil. |
Povzetek – DMEM proti EMEM
DMEM in EMEM sta dve priljubljeni gojišči za gojenje živalskih celic, ki se v glavnem razlikujeta po sestavi hranil. DMEM je modificirana oblika EMEM, kjer se koncentracije hranil povečajo skupaj z dodatkom nekaterih novih komponent. EMEM je minimalen medij in vsebuje vse bistvene dejavnike, potrebne za uspešno rast živalskih celičnih linij. Ta gojišča je treba uporabljati v visoko sterilnih pogojih, oba medija pa je treba pred uporabo dopolniti s serumom. To je razlika med DMEM in EMEM.
Prenesite PDF DMEM proti EMEM
Lahko prenesete PDF različico tega članka in jo uporabite za namene brez povezave v skladu z opombo o citiranju. Prenesite različico PDF tukaj. Razlika med DMEM in EMEM
