Ključna razlika med ionsko izmenjevalno in velikostno izključitveno kromatografijo je, da se ionsko izmenjevalna kromatografija uporablja za analizo ionskih snovi glede na naboj, medtem ko se velikostna izključitvena kromatografija uporablja za analizo velikih molekul glede na velikost.
Kromatografija je analitična tehnika, ki se lahko uporablja za analizo različnih mešanic. Kromatografske tehnike so poimenovane glede na parameter, ki se uporablja za analizo snovi – npr. kromatografija za izključitev velikosti, ionsko izmenjevalna kromatografija itd.
Kaj je ionska izmenjevalna kromatografija?
Ionska izmenjevalna kromatografija je analitična tehnika, s katero lahko analiziramo ionske snovi. Pogosto je koristno analizirati anorganske anione in katione (tj. kloridne in nitratne anione ter kalijeve in natrijeve katione). Čeprav ni zelo pogosta metoda, lahko z njo analiziramo organske ione. Poleg tega lahko to tehniko uporabimo za čiščenje beljakovin, ker so beljakovine nabite molekule pri določenih vrednostih pH. Tukaj uporabljamo trdno stacionarno fazo, na katero se lahko pritrdijo nabiti delci. Kot trdno podlago lahko na primer uporabimo kopolimere smole polistiren-divinilbenzen.
Slika 01: Teorija za ionsko izmenjevalno kromatografijo
Za nadaljnjo razlago tega povemo, da ima stacionarna faza fiksne ione, kot so sulfatni anioni ali kvartarni aminski kationi. Vsak od teh bi se moral povezati s protiionom (ionom z nasprotnim nabojem), če želimo ohraniti nevtralnost tega sistema. Če je protiion kation, potem imenujemo sistem kationska izmenjevalna smola. Če pa je protiion anion, je sistem anionska izmenjevalna smola. Poleg tega obstaja pet glavnih korakov v ionsko izmenjevalni kromatografiji:
- Začetna faza
- Adsorpcija tarče
- Začetek elucije
- Konec elucije
- Regeneracija
Kaj je izključitvena kromatografija?
Izključitvena kromatografija ali SEC je analitična tehnika, pri kateri je mogoče molekule v zmesi ločiti glede na njihovo velikost in molekulsko maso. Običajno deluje z velikimi molekulami, imenovanimi makromolekule. Običajno se za analizo uporablja vodna raztopina. Potem se imenuje gelska filtracijska kromatografija. Ko je organsko topilo, se imenuje gelska permeacijska kromatografija.
Gelska filtracijska kromatografija je oblika velikostne izključitvene kromatografije, pri kateri kot mobilno fazo uporabljamo vodno raztopino. Zato je mobilna faza, ki jo pogosto uporabljamo v tej tehniki, vodni pufer. Za to ločevanje uporabljamo tudi kromatografsko kolono, kolono pa moramo napolniti s poroznimi kroglicami. Običajno sta sefadeks in agaroza uporabna kot porozni material. Zato so ti materiali stacionarna faza našega eksperimenta. Poleg tega lahko uporabimo velikost por teh kroglic, da določimo velikost makromolekul, ki jih ločujemo. Vendar je to samo ocena.
Slika 02: Aparat za velikostno izključitveno kromatografijo
Gel permeacijska kromatografija je oblika izključitvene kromatografije, pri kateri kot mobilno fazo uporabljamo organsko topilo. Zato lahko za ta namen uporabimo raztopine, kot sta heksan in toluen. Stacionarna faza je porozen material, enako kot pri gelski filtracijski kromatografiji. Ta tehnika se pogosto uporablja za polimere in druge organsko topne materiale. Metoda delovanja tehnike je podobna kot pri gelski filtracijski kromatografiji.
Kakšna je razlika med ionsko izmenjavo in kromatografijo z izključitvijo velikosti?
Kromatografija je analitična tehnika, ki se lahko uporablja za analizo različnih mešanic. Ključna razlika med ionsko izmenjevalno in velikostno izključitveno kromatografijo je v tem, da se ionsko izmenjevalna kromatografija uporablja za analizo ionskih snovi glede na naboj, medtem ko se velikostna izključitvena kromatografija uporablja za analizo velikih molekul glede na velikost.
Spodnja infografika ponuja več informacij o razliki med ionsko izmenjavo in velikostno izključitveno kromatografijo.
Povzetek – Ionska izmenjava v primerjavi s kromatografijo izključitve velikosti
Kromatografija je analitična tehnika, ki se lahko uporablja za analizo različnih mešanic. Ključna razlika med ionsko izmenjevalno in velikostno izključitveno kromatografijo je v tem, da se ionsko izmenjevalna kromatografija uporablja za analizo ionskih snovi glede na naboj, medtem ko se velikostna izključitvena kromatografija uporablja za analizo velikih molekul glede na velikost.
