Ključna razlika – primarna celična kultura proti celični liniji
Področje raziskav je doživelo velik zasuk z uvedbo gojenja celic in uporabo celičnih linij za raziskave. Na umetno pripravljenih celicah in celičnih linijah se izvajajo različni testi, da se oceni obnašanje celice. Večina raziskav, ki temeljijo na ljudeh, zahteva gojenje celic in celičnih linij za potrditev rezultatov, zlasti kadar raziskave temeljijo na farmakologiji in odkrivanju zdravil. Primarna celična kultura je kultura, pripravljena z neposredno izolacijo celic z mehanskimi ali encimskimi metodami. Celično linijo pripravimo z neprekinjenim pasiranjem primarne celične kulture, da dobimo celično linijo, ki je pridobila homologne lastnosti. Ključna razlika med primarno celično kulturo in celično linijo je število prehodov, ki jih ima vsaka od njih. Primarna celična kultura je neposredno izolirana, medtem ko se celična linija pripravi z večkratnim pasiranjem primarne celične kulture.
Kaj je primarna celična kultura?
Primarna celična kultura je priprava celične kulture z izolacijo celic neposredno iz vira z mehanskimi ali encimskimi metodami. Celice izoliramo s tripsinizacijskimi ali netripsinizacijskimi metodami. Primarne celične kulture gojimo v ustreznih rastnih medijih, ki vsebujejo rastne faktorje, hormone, lipide in druge nedefinirane komponente. Nekatere medije mora spremljati serum. Gojišča zagotavljajo, da so pogoji za rast optimizirani in celice preživijo v optimalnih pogojih. Celice lahko izoliramo iz različnih tkivnih virov, kot so jetrno tkivo, endotelij in živčno tkivo pri ljudeh ali višjih živalih s tripsinizacijo.
Pri izolaciji celic iz rastlin in mikroorganizmov se uporabljajo posebni postopki ekstrakcije, ki uporabljajo tako mehanske kot kemične metode. Te izolirane celice je mogoče imobilizirati na trdno podlago ali pa jih je mogoče prenašati več generacij, da se razvijejo v celično linijo.
Primarne celične kulture so večinoma dveh vrst; Adherentne celične kulture in suspenzijske celične kulture. Pritrjene primarne celične kulture so odvisne od sidranja in potrebujejo trdno podporo za rast. Pritrjene primarne celične kulture so v glavnem pridobljene iz tkiv ali organov. Suspenzijske primarne celične kulture so neodvisne od sidrišča in rastejo v tekočem mediju. Suspenzijske kulture je treba med fazo rasti nenehno mešati. Suspenzijske primarne celične kulture je mogoče neposredno pridobiti iz krvi.
Primarne celične kulture imajo sorazmerno krajšo življenjsko dobo, vendar so informacije, pridobljene iz primarnih celičnih kultur v pogojih in vitro, osnovna podlaga za številne študije. Uporabni so za preučevanje značilnosti celice, tako morfološkega kot kemičnega vedenja.
Kaj je celična linija?
Celične linije se pogosto uporabljajo v raziskavah in trenutno so celične linije, kot so rakave celične linije, jetrne celične linije in ledvične celične linije, komercialno dostopne za raziskovalne namene. Celične linije so pripravljene z neprekinjenim pasiranjem primarne celične kulture. Pasaža se nanaša na postopek subkulture, kjer se celične kulture razvijejo v celično linijo. Te celične linije so kulture v dvodimenzionalnih ali tridimenzionalnih matricah in se vzdržujejo kot celične linije.
Celične linije so razvrščene kot končne in neprekinjene celične linije. Končne celične linije so podvržene določenemu številu pasaž (20 – 30 pasaž). Po opravljenem zahtevanem številu pasaž celična linija preide v fazo staranja. S temi celicami je enostavno rokovati, saj je njihova rast določena. Neprekinjene celične linije se imenujejo tudi ovekovečene celične linije. Te celične linije nimajo določenega števila prehodov. Rastejo neomejeno dolgo in tako lahko pridobivajo mutacije. Zato neprekinjene celične linije zlahka mutirajo in tako spremenijo svoje morfološke in genetske značilnosti, za razliko od končnih celičnih linij.
Slika 01: Celična linija
Uporabljamo celične linije, saj je bolj priročno kot uporaba primarne celične kulture, saj jo lahko uporabljamo znova in znova v določenem obdobju. Vendar je bolj nagnjen k mutacijam in kontaminacijam, saj se njihovo širjenje poveča.
Kakšne so podobnosti med primarno celično kulturo in celično linijo?
- Tako vrste celic kot celične kulture in celične linije se uporabljajo v raziskavah za preučevanje morfoloških, kemičnih in genetskih značilnosti celice.
- Tako vrste celične kulture kot celične linije so ekstrahirane z mehanskimi in encimskimi metodami.
- Tako tipi celične kulture kot celične linije zahtevajo rastne medije in posebne rastne pogoje.
- Tako vrste celic, kot celične kulture in celične linije so nagnjene k mutacijam.
Kakšna je razlika med primarno celično kulturo in celično linijo?
Primarna celična kultura proti celični liniji |
|
| Primarna celična kultura je kultura, pripravljena z neposredno izolacijo celic z mehanskimi ali encimskimi metodami. | Celično linijo pripravimo z nenehnim pasiranjem primarne celične kulture, da dobimo celično linijo, ki je pridobila homologne znake. |
| Število prehodov | |
| Primarne celične kulture niso pasirane, celice se vzdržujejo v pogojih kulture. | Celice se pri izdelavi celičnih linij prenašajo določeno ali nedoločeno. |
| Vrste | |
| Adherentna primarna celična kultura in suspenzijska primarna celična kultura sta dve vrsti primarnih celičnih kultur. | Končna celična linija in neprekinjena celična linija sta dve vrsti celičnih linij. |
| Življenjska doba | |
| Primarne celične kulture imajo kratko življenjsko dobo. | Celične linije imajo daljšo življenjsko dobo. |
Povzetek – Primarna celična kultura proti celični liniji
Primarne celične kulture in celične linije se pogosto uporabljajo v raziskavah za preučevanje vedenjskih vzorcev različnih celic pod različnimi pogoji in pod različnimi farmakološkimi vidiki. Primarne celične kulture se neposredno izolirajo iz izvornega organa ali tkiva in gojijo na gojišču. Pogoji so optimizirani za rast specifičnih celic. Nasprotno pa se celične linije pripravijo s pasiranjem primarnih celičnih kultur končno ali neskončno število krat. Celične linije so komercialno dostopne in so med raziskovalci priljubljene zaradi enostavne uporabe.
