Ključna razlika med Eliso in western blotom je, da je Elisa ali encimski imunski test diagnostično orodje, ki zazna, ali je bil bolnik izpostavljen določeni vrsti virusa ali drugemu povzročitelju okužbe, medtem ko je western blot tehnika, ki zazna specifično beljakovino iz vzorca beljakovine.
AIDS je postal svetovni problem in pojavnost te smrtonosne bolezni se je v zadnjih nekaj desetletjih alarmantno povečala. Testi na HIV zaznajo prisotnost virusa humane imunske pomanjkljivosti ((HIV), ki povzroča ta sindrom. Od različnih testov na HIV sta danes zelo priljubljena ELISA in Western Blot. ELISA je kratica za encimsko vezan imunski test, ki je tehnika testiranja na plošči. To je encimski imunski test, ki se uporablja za odkrivanje protiteles HIV. Western blot zazna specifično beljakovino iz mešanice beljakovin z uporabo označenega protitelesa.
Ključna razlika
1. Pregled in ključna razlika
2. Kaj je Elisa
3. Kaj je Western Blot
4. Podobnosti med Eliso in Western Blotom
5. Vzporedna primerjava – Elisa proti Western Blotu v obliki tabele
6. Povzetek
Kaj je Elisa?
ELISA, kar pomeni encimski imunosorbentni test, je bil prvi test, zasnovan predvsem za odkrivanje HIV. To je test na plošči. Uporablja se za odkrivanje protiteles HIV in ta test kaže visoko občutljivost. Pri tej tehniki se antigeni v vzorcu vežejo z imobiliziranimi protitelesi na trdni površini. Ko so imobilizirani, antigeni tvorijo komplekse s protitelesi, povezanimi z encimi. Nato se ti konjugirani encimi inkubirajo z ustreznim substratom.
Slika 01: ELISA
Reakcija encim-substrat proizvede merljiv obarvan produkt. Z merjenjem količine produkta je mogoče kvantificirati število antigenov, prisotnih v vzorcu. Zato je ELISA zelo specifična in prefinjena tehnika, ki zahteva pozornost dobro usposobljenih tehnikov. To je tudi dolgotrajen postopek z zahtevo po napredni opremi.
Kaj je Western Blot?
Western blot je tehnika, ki omogoča detekcijo specifičnega proteina iz beljakovinske mešanice. Western blot je membrana, ki se uporablja med postopkom blotiranja za pridobitev zrcalne slike vzorcev beljakovin v SDS-poliakrilamidnem gelu. Membrana, ki se uporablja za Western blot, je večinoma sestavljena iz nitroceluloze ali poliviniliden difluorida (PVDF). Membrana s prenesenim proteinom se lahko uporabi za identifikacijo določenega proteina. Za detekcijo želenega proteina s hibridizacijo je potrebno visokokakovostno protitelo. Protitelo se veže na svoj specifični antigen in razkrije prisotnost želenega antigena, ki je protein.
Slika 02: Western Blot
Prenos proteinov iz SDS poliakrilamidnega gela v western blot se izvede z elektroblotom. Je učinkovita in hitra metoda, ki povzroči, da proteini z elektroforezo izstopijo iz gela in preidejo na nitrocelulozno membrano (western blot).
Western blot je uporaben pri odkrivanju protiteles proti HIV v vzorcu človeškega seruma. Western blot se lahko uporablja tudi kot potrditveni test za okužbo s hepatitisom B in dokončen test za bolezen norih krav.
Kakšne so podobnosti med Eliso in Western Blotom?
- Elisa in western blot sta dve vrsti tehnik, ki se uporabljata za diagnosticiranje HIV.
- Obe metodi temeljita na imunski detekciji.
- Temeljijo na tvorbi kompleksa protitelo-protein.
- Obe metodi lahko analizirata beljakovine.
- Elisa in western blotting sta zamudni tehniki.
- Za izvajanje teh tehnik je potrebno dobro usposobljeno in usposobljeno osebje.
Kakšna je razlika med Eliso in Western Blotom?
ELISA je zelo občutljiva in zelo sofisticirana metoda, ki odkrije prisotnost antigena in protiteles v pacientovi krvi, western blot pa je tehnika, ki odkrije specifičen protein iz proteinske mešanice. To je ključna razlika med Eliso in Western blotom. Elisa je tako kvalitativna kot kvantitativna. Nasprotno pa je Western blot kakovosten. Včasih je polkvantitativno. Če upoštevamo čas, potreben za test, je test Elisa dolgotrajen, medtem ko je Western blot zamudnejši od Elisa.
Spodnja infografika povzema razliko med Eliso in western blotom.
Povzetek – Elisa proti Western Blotu
ELISA je zelo občutljiva in zelo sofisticirana metoda, ki ugotavlja prisotnost antigena in protiteles v naši krvi. Po drugi strani pa je tehnika Western blotting razvita za identifikacijo specifičnega proteina iz beljakovinske mešanice. To je ključna razlika med Eliso in Western blotom. ELISA je bil prvi test za odkrivanje virusa HIV. Za potrditev rezultatov testa ELISA lahko uporabite Western Blot. Tako ELISA kot Western Blot veljata za posredni metodi za odkrivanje HIV.
