Ključna razlika med RIA in ELISA je, da je radioimunski test (RIA) tehnika imunskega testa, ki uporablja radioizotope za odkrivanje kompleksov antigen-protitelo, medtem ko je encimski imunski test (ELISA) tehnika imunskega testa, ki uporablja encime za odkrivanje antigena -kompleksi protiteles.
Detekcija specifičnih proteinov, kot so antigeni, je izjemno pomembna pri diagnozi bolezni. Zato sta RIA in ELISA dve tehniki imunskega testa, ki se uporabljata v laboratorijih za hitro odkrivanje specifičnih beljakovin, zlasti antigenov. Na splošno se specifično protitelo veže na ciljni antigen in tvori viden kompleks, znan kot precipitin. Te komplekse protiteles in antigenov je mogoče identificirati z različnimi tehnikami. Tehnika odkrivanja kompleksa antigen-protitelo z uporabo radioizotopov je znana kot RIA, tehnika odkrivanja kompleksa antigen-protitelo z uporabo encimov pa je znana kot ELISA.
Kaj je RIA?
Radioimunski test (RIA) je tehnika imunskega testa, ki zaznava komplekse antigena in protiteles z uporabo radioizotopov. Rosalyn Sussman Yalow je to tehniko razvila leta 1960 s pomočjo Solomona Bersona. Za to izjemno odkritje je Rosalyn Sussman Yalow leta 1977 prejela Nobelovo nagrado za medicino. Običajno je pri radioimunskih testih znana količina antigena najprej radioaktivna. Ta tehnika za označevanje pogosto uporablja gama-radioaktivne izotope joda, imenovane 125-I. antigeni. Ti radioizotopi se običajno vežejo na aminokislino tirozin antigena. Nato se radioaktivno označeni antigen zmeša s protitelesom. Posledično se radioaktivno označeni antigen in protitelo specifično vežeta drug na drugega.
Kasneje se doda vzorec seruma, ki vsebuje neznano količino istega antigena. To povzroči, da neoznačeni antigen iz seruma tekmuje z radioaktivno označenim antigenom za mesta vezave protiteles. Ko koncentracija neoznačenega antigena narašča, se ga več veže na protitelo in izpodriva radioaktivno označeno različico. Tako zmanjša razmerje med radioaktivno označenim antigenom, vezanim na protitelesa, in prostim radioaktivno označenim antigenom. Na koncu postopka se vezani antigeni izločijo. Nazadnje se radioaktivnost prostih antigenov v preostalem supernatantu izmeri s števcem gama.
Kaj je ELISA?
ELISA je tehnika imunskega testa, ki zaznava komplekse antigena in protiteles z uporabo encimov. To je biokemični analitični test, ki sta ga leta 1971 prvič opisala Engvall in Perlmann. V večini preprostih oblik tehnik ELISA so antigeni pacientovega vzorca pritrjeni na trdno površino. Nato se na površino nanese ustrezno protitelo, da se lahko veže na antigen.
Slika 01: ELISA
To protitelo je povezano z encimom. Kasneje se morebitna nevezana protitelesa odstranijo s pranjem z detergentom. V zadnjem koraku te tehnike se doda encimski substrat. Če pride do pravilne vezave antigena in protitelesa, poznejša reakcija povzroči zaznaven barvni signal, najpogosteje spremembo barve.
Kakšne so podobnosti med RIA in ELISA?
- RIA in ELISA sta tehniki imunskega testa.
- Obe tehniki omogočata tvorbo kompleksov antigena in protiteles.
- Te tehnike je mogoče uporabiti za odkrivanje neznanih beljakovin v vzorcih.
- Oboje se uporablja pri diagnostiki bolezni v laboratorijih.
- Obe sta zelo specifični in občutljivi tehniki.
Kakšna je razlika med RIA in ELISA?
RIA je tehnika imunskega testa za odkrivanje kompleksa antigen-protitelo z uporabo radioizotopov. ELISA je tehnika imunskega testa za odkrivanje kompleksa antigen-protitelo z uporabo encimov. Torej, to je ključna razlika med RIA in ELISA. Poleg tega je pri tehniki RIA antigen označen, pri ELISA pa je označeno protitelo. Poleg tega so pri tehniki RIA označevalne molekule radioizotopi, medtem ko so pri ELISA označevalne molekule encimi. To je torej še ena razlika med RIA in ELISA.
Spodnja infografika prikazuje več razlik med RIA in ELISA v obliki tabele.
Povzetek – RIA proti ELISA
Imunski testi imajo zelo pomembno vlogo v različnih bioanalitičnih okoljih, kot so klinična diagnostika, biofarmacevtska analiza, spremljanje okolja, biološka varnost in testiranje hrane. Od leta 1960 je bil razvit širok nabor imunskih testov. RIA in ELISA sta tehniki imunskega testa. RIA je tehnika imunskega testa za odkrivanje kompleksa antigen-protitelo z uporabo radioizotopov. ELISA je tehnika imunskega testa za odkrivanje kompleksa antigen-protitelo z uporabo encimov. To je torej povzetek razlike med RIA in ELISA.
