Ključna razlika med fluorescenčno mikroskopijo in konfokalno mikroskopijo je, da je pri fluorescenčni mikroskopiji celoten preparat enakomerno preplavljen s svetlobo iz svetlobnega vira, medtem ko so pri konfokalni mikroskopiji le nekatere točke preparata izpostavljene svetlobi iz vir svetlobe.
Fluorescenčna mikroskopija je pomembna analitična tehnika, ki je uporabna pri preučevanju lastnosti organskih ali anorganskih snovi. Konfokalna mikroskopija je analitična tehnika, ki je uporabna za povečanje optične ločljivosti in kontrasta mikrofotografije z uporabo prostorske luknjice za blokiranje neizostrene svetlobe pri oblikovanju slike.
Kaj je fluorescenčna mikroskopija?
Fluorescenčna mikroskopija je pomembna analitična tehnika, ki je uporabna pri preučevanju lastnosti organskih ali anorganskih snovi. Instrument, ki ga uporabljamo za to meritev, je fluorescenčni mikroskop. Je vrsta optičnega mikroskopa. Ta vrsta optičnega mikroskopa uporablja fluorescenco namesto sipanja, odboja, slabljenja in absorpcije ali poleg njih.
Fluorescenčni mikroskop uporablja fluorescenco za ustvarjanje slike. To je lahko preprosta postavitev, kot je epifluorescenčni mikroskop, ali bolj zapletena zasnova, vključno s konfokalnim mikroskopom, ki uporablja optično rezanje. To pomaga pri boljši ločljivosti fluorescenčne slike.
Slika 01: Fluorescenčni mikroskop
Ko upoštevamo princip fluorescenčne mikroskopije, moramo preparat uporabiti za osvetljevanje s svetlobo določene valovne dolžine. Tam vzorec absorbira svetlobo s fluoroforji, zaradi česar oddajajo svetlobo daljših valovnih dolžin. Pomembno je ločiti osvetljeno svetlobo od veliko šibkejše oddane fluorescence z uporabo spektralnega emisijskega filtra.
Fluorescenčni mikroskop običajno vsebuje vir svetlobe, vzbujevalni filter, dihroično zrcalo in emisijski filter. Vir svetlobe je lahko ksenonska žarnica, živosrebrna žarnica, LED diode in laserji. Dihroično zrcalo je znano tudi kot dihroični cepilnik žarkov.
Kaj je konfokalna mikroskopija?
Konfokalna mikroskopija je analitična tehnika, ki je uporabna za povečanje optične ločljivosti in kontrasta mikrofotografije z uporabo prostorske luknjice za blokiranje neizostrene svetlobe pri oblikovanju slike. Znana je tudi kot konfokalna laserska vrstična mikroskopija ali laserska konfokalna vrstična mikroskopija. Je tehnika optičnega slikanja.
Pri tej mikroskopski tehniki zajemanje več 2D slik na različnih globinah v vzorcu omogoča rekonstrukcijo 3D struktur znotraj predmeta. Konfokalna mikroskopska tehnika je zelo uporabna v znanstvenih in industrijskih skupnostih. Običajno se uporablja v znanostih o življenju, pregledu polprevodnikov in znanosti o materialih.
Slika 02: Princip senzorja konfokalne točke iz Minskyjevega patenta
Med postopkom potuje svetloba skozi vzorec pod običajnim mikroskopom tako daleč v vzorec, kot bi lahko prodrla, medtem ko konfokalni mikroskop, ki fokusira le manjši žarek svetlobe, prehaja skozi ozko globinsko raven naenkrat. To tehniko je leta 1957 razvil Marvin Minsky.
Kakšna je razlika med fluorescenčno mikroskopijo in konfokalno mikroskopijo?
Fluorescenčna mikroskopija je pomembna analitična tehnika, ki je uporabna pri preučevanju lastnosti organskih ali anorganskih snovi. Konfokalna mikroskopija je analitična tehnika, ki je uporabna za povečanje optične ločljivosti in kontrasta mikrofotografije z uporabo prostorske luknjice za blokiranje neizostrene svetlobe pri oblikovanju slike. Ključna razlika med fluorescenčno mikroskopijo in konfokalno mikroskopijo je v tem, da je pri fluorescenčni mikroskopiji celoten vzorec enakomerno preplavljen s svetlobo iz svetlobnega vira, medtem ko so pri konfokalni mikroskopiji le nekatere točke vzorca izpostavljene svetlobi iz svetlobnega vira.
Spodnja infografika predstavlja razlike med fluorescenčno mikroskopijo in konfokalno mikroskopijo v obliki tabele za vzporedno primerjavo.
Povzetek – Fluorescenčna mikroskopija v primerjavi s konfokalno mikroskopijo
Fluorescenčna mikroskopija in konfokalna mikroskopija sta dve analitični tehniki, vključeni v optično slikanje. Ključna razlika med fluorescenčno mikroskopijo in konfokalno mikroskopijo je v tem, da je pri fluorescenčni mikroskopiji celoten vzorec enakomerno preplavljen s svetlobo iz svetlobnega vira, medtem ko so pri konfokalni mikroskopiji le nekatere točke vzorca izpostavljene svetlobi iz svetlobnega vira.