Ključna razlika med UV vis in fluorescenčno spektroskopijo je v tem, da UV-vidna spektroskopija meri absorpcijo svetlobe v UV-vidnem območju, medtem ko fluorescenčna spektroskopija meri svetlobo, ki jo oddaja vzorec v fluorescenčnem območju po absorpciji svetlobe pri večja energija od oddane ravni energije.
Spektroskopija je tehnika za merjenje absorpcije in emisije svetlobe in drugih sevanj snovi.
Kaj je UV Vis spektroskopija?
UV vidna spektroskopija je analitična tehnika, ki uporablja absorpcijo ali odbojnost dela UV območja in celotnega sosednjega vidnega območja elektromagnetnega spektra. Ta tehnika je na voljo v dveh vrstah; sta absorpcijska spektroskopija in refleksijska spektroskopija. Uporablja svetlobo v vidnem in sosednjem območju.
Na splošno lahko absorpcija ali odboj vidne svetlobe neposredno vplivata na zaznano barvo kemikalij, ki so vključene v proces. Na tem območju spektra lahko opazimo, da so lahko atomi in molekule podvrženi elektronskim prehodom. Pri tem je absorpcijska spektroskopija komplementarna fluorescenčni spektroskopiji, kjer se fluorescenca ukvarja s prehodi elektronov iz vzbujenega stanja v osnovno stanje. Poleg tega absorpcija meri prehode iz osnovnega v vzbujeno stanje.
Slika 01: UV vidna spektroskopija
Ta spektroskopska tehnika je uporabna pri kvantitativni analizi različnih vzorcev, kot so ioni prehodnih kovin, visoko konjugirane organske spojine in makromolekule v bioloških sistemih. Na splošno se spektroskopska analiza izvaja z uporabo raztopin, vendar lahko uporabimo tudi trdne snovi in pline.
Kaj je fluorescenčna spektroskopija?
Fluorescenčna spektroskopija je vrsta elektromagnetne spektroskopije, ki je uporabna pri analizi fluorescence iz vzorca. Ta tehnika vključuje uporabo žarka svetlobe (kot je UV) za vzbujanje elektronov v molekulah nekaterih spojin in lahko povzroči, da oddajajo svetlobo. Običajno je ta emisija vidna svetloba, vendar ni nujno enaka.
Slika 02: Fluorescenčna spektroskopija
Molekule imajo običajno različna stanja, ki so znana kot energijske ravni. Ta tehnika se ukvarja predvsem z elektronskimi in vibracijskimi stanji. Pogosto ima vzorec analita molekule v osnovnem elektronskem stanju in vzbujenem stanju z višjo energijo. Ti dve elektronski stanji imata med seboj različna vibracijska stanja. Med procesom fluorescence se kemične vrste vzbudijo z absorpcijo fotonov in preidejo iz osnovnega stanja na višjo energijsko raven. Nato trki med drugimi molekulami povzročijo, da vzbujene molekule izgubijo vibracijsko energijo, dokler iz tega vzbujenega stanja ne pridejo v nizko vibracijsko stanje. Ta oddaja fotone z različnimi energijami in različnimi frekvencami. To se imenuje fluorescenca. Te različne frekvence, ki se oddajajo na ta način, lahko analiziramo, da določimo različne ravni vibracij.
Kakšna je razlika med UV Vis in fluorescenčno spektroskopijo?
Spektroskopske tehnike so uporabne pri proučevanju lastnosti različnih kemičnih snovi. Ključna razlika med UV vis in fluorescenčno spektroskopijo je v tem, da UV-vidna spektroskopija meri absorpcijo svetlobe v UV-vidnem območju, medtem ko fluorescenčna spektroskopija meri svetlobo, ki jo oddaja vzorec v fluorescenčnem območju po absorpciji svetlobe z energijo, ki je višja od oddane raven energije. Poleg tega je fluorescenčna spektroskopija bolj občutljiva kot UV-vidna spektroskopija.
Spodnja infografika predstavlja razlike med UV vis in fluorescenčno spektroskopijo v obliki tabele za vzporedno primerjavo.
Povzetek – UV Vis proti fluorescenčni spektroskopiji
Spektroskopija je pomembna analitična tehnika. Obstajajo različne vrste spektroskopij, kot so IR spektroskopija, UV vidna spektroskopija, fluorescenčna spektroskopija itd. Ključna razlika med UV vis in fluorescenčno spektroskopijo je v tem, da UV-vidna spektroskopija meri absorpcijo svetlobe v UV-vidnem območju, medtem ko fluorescenčna spektroskopija meri svetlobo, ki jo oddaja vzorec v območju fluorescence po absorpciji svetlobe pri energiji, višji od ravni oddane energije.
