Ključna razlika med CLIA in ECLIA je, da CLIA uporablja kemično metodo za generiranje kemiluminiscence, medtem ko ECLIA uporablja elektrokemično metodo za generiranje kemiluminiscenčnih signalov v tehniki imunskega testa.
Imunski testi se pogosto uporabljajo pri identifikaciji in kvantifikaciji beljakovin, povezanih z boleznimi ali okužbami. Zato se primarno zanašajo na koncept vezave protitelo-antigen. Obstaja veliko vrst imunskih testov in kemiluminiscenčni imunski testi so ena takih nastajajočih razvojnih tehnik. Tako CLIA kot ECLIA uporabljata kemiluminiscenčne indikatorje.
Kaj je CLIA?
Chemiluminescent Immunoassay (CLIA) je vrsta imunskega testa, ki za odkrivanje uporablja luminescentno molekulo. Luminiscenco, ki jo oddaja molekula, zazna spektrofotometer, običajno pri valovni dolžini med 300 – 800 nm. Kemiluminiscenca povzroči vzbujanje atomov, tehnika pa identificira eksergonske kemične reakcije kot najprimernejši vir energije za ustvarjanje vzbujanja.
Tehnika CLIA poteka v dveh glavnih metodah, in sicer direktni tehniki CLIA in posredni tehniki CLIA. Direktna tehnika CLIA uporablja neposredne luminoforne markerje, ki so vezani na tarčo, medtem ko posredna metoda CLIA uporablja encimske markerje. Neposredni luminoforni markerji vključujejo acidum in rutenijeve estre, medtem ko posredni markerji vključujejo alkalno fosfatazo s substratom adamantil 1, 2-dioksetan aril fosfata (AMPPD) in hrenovo peroksidazo z luminolom ali njegovimi derivati kot substratom.
Slika 01: Kemiluminiscenca
Ključne prednosti CLIA so širok dinamični razpon funkcionalnosti, visoka intenzivnost podajanja signala, odsotnost motenj v ozadju, visoka specifičnost, hitrost, stabilnost in združljivost z različnimi testnimi protokoli. Nasprotno pa so njihovi visoki stroški in omejitve v zvezi z odkrivanjem antigenov in testnimi ploščami slabosti CLIA.
Kaj je ECLIA?
Electrochemiluminescence Immunoassay (ELCIA) je nova tehnika razvoja imunskega testa, ki uporablja koncept elektrokemiluminiscence. V konceptu elektroluminiscence intermediati nastajajo elektrokemično. Ti elektronsko ustvarjeni intermediati nato dosežejo vzbujeno stanje in povzročijo emisijo svetlobe. Valovna dolžina, pri kateri se svetloba oddaja, ustreza energijski vrzeli. Kemiluminiscenca torej nastane zaradi elektrokemične proizvodnje enega ali več reaktantov na elektrodi.
ECLIA je uporabna analitična aplikacija z visoko občutljivostjo in specifičnostjo. Uporablja se predvsem za identifikacijo beljakovin, povezanih z različnimi patološkimi in zdravstvenimi stanji. Njegove ključne prednosti so širši dinamični razpon, vsestranskost, prostorski in časovni nadzor z uporabo elektrodnih potencialov, visoka občutljivost do pikomolarnih razponov. Vendar sta dejstvo, da zahteva strokovno rokovanje, in s tem povezani visoki stroški njegova pomanjkljivost.
Kakšne so podobnosti med CLIA in ECLIA?
- Obe tehniki temeljita na konceptu vezave antigen-protitelo.
- Poleg tega se oba uporabljata predvsem za diagnostiko bolezni na podlagi kvantifikacije beljakovin.
- Obe sta občutljivi in specifični metodi kompleta.
- Za detekcijo uporabljajo koncept kemiluminiscence.
- Lahko so avtomatizirani.
- Oba zahtevata spektrofotometer za detekcijo.
- Oba imata širok dinamični razpon.
- To so drage tehnike.
Kakšna je razlika med CLIA in ECLIA?
CLIA je tehnika imunskega testa, ki uporablja teorijo kemiluminiscence, medtem ko je ECLIA tehnika imunskega testa, ki uporablja teorijo elektrokemije skupaj s kemiluminiscenco. Torej, to je ključna razlika med CLIA in ECLIA. Zato CLIA uporablja kemične reakcije, ki vodijo do razvoja kemiluminiscenčnih signalov, medtem ko ECLIA uporablja elektrokemične reakcije, ki vodijo do razvoja kemiluminiscenčnih signalov.
Spodnja infografika o razlikah med CLIA in ECLIA prikazuje več primerjav med obema tehnikama.
Povzetek – CLIA proti ECLIA
CLIA in ECLIA sta tehniki, ki igrata pomembno vlogo pri diagnostiki bolezni. So napredne metode imunodiagnostike, ki temeljijo na konceptu vezave protitelo-antigen. Ključna razlika med CLIA in ECLIA je metoda generiranja kemiluminiscence. Medtem ko CLIA uporablja kemične reakcije za ustvarjanje kemiluminiscence po vezavi protitelesa na antigen, ECLIA uporablja elektrokemične reakcije za ustvarjanje kemiluminiscence. Vendar sta obe tehniki hitri in specifični.
