Ključna razlika med HEK293 in HEK293t je v tem, da je HEK293 ovekovečena celična linija, pridobljena iz embrionalne človeške ledvice, ki je transfektirana s striženo DNA človeškega adenovirusa tipa 5, medtem ko je HEK293t hčerinska celična linija, pridobljena iz originalne celične linije HEK293, ki je transfektiran s plazmidnim vektorjem, ki nosi izvor replikacije SV40.
Transfekcijo običajno definiramo kot proces vnosa tuje DNA in RNA v celice, da bi vplivali na njihov genotip in fenotip. Takšni vnosi tujih nukleinskih kislin z različnimi biološkimi, kemičnimi in fizikalnimi metodami lahko spremenijo lastnosti celice. Navsezadnje to omogoča preučevanje delovanja genov in izražanja beljakovin v kontekstu celice. HEK293 in HEK293t sta dve celični liniji, ki se že vrsto let obsežno uporabljata v raziskavah celične biologije zaradi svoje nagnjenosti k transfekciji.
Kaj je HEK293?
HEK293 je ovekovečena celična linija, pridobljena iz embrionalne človeške ledvice, ki je transfektirana s striženo DNA človeškega adenovirusa tipa 5, da proizvede veliko rekombinantnih proteinov. HEK293 je prvotno iz človeških ledvičnih celic izoliral nizozemski biolog Alex Van der Eb leta 1973. Te celice so bile vzgojene v tkivni kulturi iz ženskega ploda. Kasneje jih je Frank Graham, podoktorski sodelavec v Van der Ebovem laboratoriju, transfektiral s striženim človeškim adenovirusom tipa 5DNA. To celično linijo so poimenovali HEK293, ker je bil Frankov poskus 293rd.
Slika 01: HEK293
Vključitev adenovirusnih genov v celični genom HEK omogoča tem celicam, da zelo učinkovito proizvajajo veliko količino rekombinantnih proteinov. Poleg tega adenovirusni vektor vsebuje promocijsko regijo CMV; zato to učinkovitost še poveča. Ta celična linija je bila uporabljena kot gostiteljica za študije izražanja genov. To celično linijo uporablja tudi biotehnološka industrija za proizvodnjo terapevtskih beljakovin za gensko terapijo.
Kaj je HEK293t?
HEK293t je hčerinska celična linija, pridobljena iz izvirne celične linije HEK293, ki je transfektirana s plazmidnim vektorjem, ki nosi izvor replikacije SV40, da proizvede veliko količino rekombinantnih proteinov. HEK293t je človeška celična linija, ki izraža mutirano različico velikega T antigena SV40. HEK293t je bil ustvarjen v laboratoriju Michele Carlos na Stanfordu s stabilno transfekcijo celične linije HEK29E s plazmidom, ki kodira temperaturno občutljiv mutant velikega T antigena SV40. Prvotno se je imenoval 293/tsA1609neo. To je zato, ker je bila transfekcija uporabljena za ustvarjanje celične linije, ki daje odpornost na neomicin in izražanje alela tsA 1609 velikega T antigena SV40.
Slika 02: HEK293t
Zaradi ekspresije mutirane različice velikega antigena T SV40 lahko transfektirani plazmidi z izvorom replikacije SV 40 močno povečajo količino rekombinantnega proteina. Ta celična linija se običajno uporablja v biotehnološki industriji za izražanje beljakovin in proizvodnjo rekombinantnih retrovirusov.
Kakšne so podobnosti med HEK293 in HEK293t?
- HEK293 in HEK293t sta dve celični liniji, ki se obširno uporabljata v raziskavah celične biologije zaradi njune nagnjenosti k transfekciji.
- Obe celični liniji sta pridobljeni v laboratoriju.
- Te celične linije lahko močno povečajo količino proizvodnje rekombinantnih beljakovin.
- Nastanejo s transfekcijo embrionalnih človeških ledvičnih celic s plazmidnim vektorjem.
Kakšna je razlika med HEK293 in HEK293t?
HEK293 je ovekovečena celična linija, pridobljena iz embrionalne človeške ledvice, ki je transficirana s striženo DNA človeškega adenovirusa tipa 5. V nasprotju s tem je HEK293t hčerinska celična linija, pridobljena iz originalne celične linije HEK293, ki je transfektirana s plazmidnim vektorjem, ki nosi izvor replikacije SV40. Torej, to je ključna razlika med HEK293 in HEK293t. Poleg tega HEK293 ne izraža mutirane različice velikega T antigena SV40. Po drugi strani pa HEK293t izraža mutirano različico velikega antigena T SV40.
Naslednja infografika navaja razlike med HEK293 in HEK293t v obliki tabele za vzporedno primerjavo.
Povzetek – HEK293 proti HEK293t
HEK293 in HEK293t sta dve celični liniji, ki se obširno uporabljata v raziskavah celične biologije zaradi svoje stalne rasti in nagnjenosti k transfekciji. HEK293 je ovekovečena celična linija, pridobljena iz embrionalne človeške ledvice, ki je transfektirana s striženo DNA človeškega adenovirusa tipa 5, medtem ko je HEK293t hčerinska celična linija, pridobljena iz originalne celične linije HEK293, ki je transfektirana s plazmidnim vektorjem, ki nosi izvor replikacije SV40. To torej povzema razliko med HEK293 in HEK293t.
