Ključna razlika med pBR322 in pUC19 je, da je pBR322 plazmidni vektor, ki ima 4361 baznih parov, medtem ko je pUC19 plazmidni vektor, ki ima 2686 baznih parov.
Klonirni vektor je majhen košček DNK, ki ga je mogoče vzdrževati v organizmu stabilno. Je tudi majhen košček DNK, v katerega je mogoče vstaviti tuj delček DNK za namene kloniranja. Vektor vsebuje pomembne značilnosti, ki omogočajo priročno vstavljanje tujega fragmenta DNA v vektorje, kot so restrikcijska mesta, izbirni marker, reporterski gen in element izražanja. Kloniranje je bilo najprej izvedeno z uporabo E.coli. Vektorji za kloniranje E. coli vključujejo plazmide, bakteriofage, kozmide in bakterijske umetne kromosome (BAC). Najpogosteje uporabljeni vektorji so gensko spremenjeni plazmidi. pBR322 in pUC19 sta dve vrsti plazmidnih vektorjev.
Kaj je pBR322?
pBR322 je plazmidni vektor. Je eden prvih široko uporabljenih vektorjev za kloniranje E. coli. Ta vektor je bil prvič ustvarjen leta 1977 v laboratoriju Herberta Boyerja na kalifornijski univerzi v San Franciscu. To je krožna dvoverižna DNK, ki je dolga 4361 baznih parov.
Slika 01: pBR322
Ta plazmidni vektor ima posebne značilnosti. Običajno ima dva gena za odpornost na antibiotike: gen bla, ki kodira protein odpornosti na ampicilin (AmpR), in gen tetA, ki kodira odpornost na tetracikline (TetR) beljakovine. Poleg tega vsebuje izvor replikacije pMB1. Ta plazmidni vektor ima tudi gen rop, ki kodira omejevalnik števila kopij plazmida. Poleg tega ima ta vektor edinstvena restrikcijska mesta za več kot 40 restrikcijskih encimov. Enajst od teh štiridesetih restrikcijskih mest leži znotraj TetR gene. Obstajata dve restrikcijski mesti za restrikcijska encima HindIII in ClaI znotraj promotorja gena TetR . Poleg tega je znotraj gena AmpR šest zelo pomembnih restrikcijskih mest. pBR322 je vektor za kloniranje z nizkim številom kopij. Zagotavlja približno 20 kopij plazmida na bakterijsko celico. Molekulska masa vektorja je 2,83×106 d altonov.
Kaj je pUC19?
pUC19 je plazmidni vektor, ki je dolg 2686 baznih parov. Je eden od serije plazmidnih vektorjev, ki so jih ustvarili Joachim Messing in sodelavci. Zgodnje delo na tej seriji plazmidov je potekalo na Univerzi v Kaliforniji. Je krožna dvoverižna DNK.
Slika 02: pUC19
Ta plazmidni vektor vsebuje tudi pomembne značilnosti. Ima N terminalni fragment gena β-glaktozidaze (lacz). Ima tudi regijo več mest za kloniranje (MCS). Ta regija je razdeljena na kodona 6 in 7 gena lacz. Področje MCS ponuja številna restrikcijska mesta za restrikcijske endonukleaze. Poleg gena za β-glaktozidazo pUC19 kodira tudi gen za odpornost na ampicilin (AmpR). Poleg tega izvor replikacije izhaja iz plazmida pMB1. Čeprav je pUC19 majhen, ima visoko število kopij (500-700 kopij na bakterijsko celico). Molekulska masa tega plazmidnega vektorja je 1,75×106 d altonov.
Kakšne so podobnosti med pBR322 in pUC19?
- pBR322 in pUC19 sta dve vrsti plazmidnih vektorjev.
- So priljubljeni vektorji za kloniranje coli.
- Oba plazmidna vektorja imata isto izvorno replikacijsko obliko plazmida pMB1.
- Ti vektorji imajo več restrikcijskih mest.
- Oba plazmidna vektorja imata gen za odpornost na ampicilin kot izbirni marker.
Kakšna je razlika med pBR322 in pUC19?
pBR322 je plazmidni vektor, ki je dolg 4361 baznih parov, medtem ko je pUC19 plazmidni vektor, ki je dolg 2686 baznih parov. To je torej ključna razlika med pBR322 in pUC19. Poleg tega je pBR322 plazmidni vektor z nizkim številom kopij, medtem ko je pUC19 plazmidni vektor z visokim številom kopij.
Spodnja infografika predstavlja razlike med pBR322 in pUC19 v obliki tabele za vzporedno primerjavo.
Povzetek – pBR322 proti pUC19
Najpogosteje uporabljeni vektorji za kloniranje E.coli so gensko spremenjeni plazmidi.pBR322 in pUC19 sta dve vrsti plazmidnih vektorjev. pBR322 je plazmidni vektor, ki je dolg 4361 baznih parov, medtem ko je pUC19 plazmidni vektor, ki je dolg 2686 baznih parov. Torej, to je ključna razlika med pBR322 in pUC19.
