Ključna razlika – adherentne in suspenzijske celične linije
Celična linija je trajno vzpostavljena celična kultura, ki jo je mogoče razmnoževati in gojiti pod posebnimi pogoji. Več celičnih linij, kot so rakave celične linije, hepatociti in celice kostnega mozga, se ohranjajo kot celične linije zaradi lažjega raziskovanja. Celične linije so pripravljene iz primarnih kultur in so lahko večinoma dveh vrst, in sicer adherentne celične kulture in suspenzijske celične kulture. Tako se celične linije, pridobljene iz teh kultur, imenujejo adherentne celične linije in suspenzijske celične linije. Adherentne celične linije so celične linije, v katerih so primarne kulture pritrjene na trdno oporo in so torej od sidranja odvisne celice. Suspenzijske celične linije so celične linije, v katerih so kulture suspendirane v tekočem mediju, celice pa tako ostanejo v tekočem mediju. Niso odvisni od sidrišča. Ključna razlika med celičnimi linijami Adherent in Suspension je odvisnost celic od sidranja. Pritrjene celične linije potrebujejo trdno podporo za svojo rast, zato so odvisne od pritrdišča, medtem ko so suspenzijske celične linije neodvisne od pritrdišča in ne potrebujejo trdne podpore za rast.
Kaj so adherentne celične linije?
Prilepljene celične linije so celične linije, ki so odvisne od sidranja. Zato te celične linije potrebujejo stabilno podporo za svojo rast. Večina ekstrahiranih celic vretenčarjev (razen hematopoetskih celic) je odvisnih od sidranja. Zato se večina celic vretenčarjev goji skupaj z adherentom, ki bo zagotovil enakomerno rast celic.
Večina adherentnih celičnih linij se vzpostavi v posodi, obdelani s tkivno kulturo, njihova rast pa je omejena na območje žile ali adherenta. Pri obdelavi celic za gojenje adherentnih celičnih linij je treba celice disociirati s tripsinizacijo in nato uporabiti ponavljajoče se tehnike pasiranja za vzpostavitev adherentnih celičnih linij. Običajne uporabe celičnih linij, pripravljenih iz adherentnih kultur, so v citologiji in citogenetiki. Uporabljajo se tudi v raziskovalne namene.
Kaj so suspenzijske celične linije?
Vzmetne celične linije so neodvisne od sidranja. Izhajajo iz suspenzijske kulture, ki lahko zlahka raste v suspendiranem tekočem mediju. Suspenzijske celične kulture je treba nenehno mešati, da se ohrani njihova rast. Človeške hematopoetske celice se večinoma gojijo kot suspenzijske kulture in se tako vzdržujejo kot suspenzijske celične linije, ko se uporabljajo v raziskovalne namene.
Vzdrževanje suspenzijskih celičnih linij zahteva stalno mešanje in nekaj postopkov pasiranja. Rast suspenzijskih celic je omejena s koncentracijo celic v mediju. Tako se sčasoma rastni faktorji in sestavine medija izčrpajo, kar omejuje rast celic.
Slika 01: Suspenzijska kultura Pseudomonas spp
Suspenzijske celične linije so najbolj razširjena vrsta primarnih celičnih linij v komercialni proizvodnji. Večina mikrobnih celic se vzdržuje kot suspenzijske celice, kjer se uporabljajo za ekstrakcijo uporabnih sekundarnih metabolitov, kot so antibiotiki, vitamini, aminokisline in beljakovine. Kulture suspenzijskih celičnih linij dajejo veliko več produktov kot adherentne celične linije in so manj naporne ter zahtevajo manj stroškov v primerjavi z adherentnimi celičnimi linijami.
Kakšne so podobnosti med adherentnimi in suspenzijskimi celičnimi linijami?
- Tako adherentne kot suspenzijske celične linije izhajajo iz primarnih celičnih kultur.
- Tako adherentne kot suspenzijske celične linije zahtevajo optimalne medije in rastne pogoje, da omogočijo maksimalno rast.
- Tako Adherentne kot Suspension celične linije so pripravljene v in vitro pogojih in jih je mogoče shraniti pod posebnimi pogoji shranjevanja.
- Tako adherentne kot suspenzijske celične linije zahtevajo neprekinjeno pasažo za povečanje izkoristka.
- Tako adherentne kot suspenzijske celične linije se uporabljajo v tehnikah tkivne kulture, v farmakoloških študijah za oceno presnove zdravil in pri diagnostiki bolezni.
Kakšna je razlika med adherentnimi in suspenzijskimi celičnimi linijami?
Adherentne proti suspenzijskim celičnim linijam |
|
| Prilepljene celične linije so celične linije, v katerih so primarne kulture pritrjene na trdno oporo. | Suspenzijske celične linije so celične linije, v katerih so kulture suspendirane v tekočem mediju, celice pa tako ostanejo v tekočem mediju. |
| Anchorage Dependency | |
| Prilepljene celične linije so odvisne od sidranja. | Celične linije vzmetenja so neodvisne od sidranja. |
| Agitacija | |
| Prilepljene celične linije ne zahtevajo mešanja. | Suspenzijske celične linije zahtevajo mešanje. |
| Tripsinizacija | |
| Tripsinizacija je prisotna v adherentnih celičnih linijah. | Tripsinizacije ni v suspenzijskih celičnih linijah. |
| Žile, obdelane s tkivno kulturo | |
| Potrebno v sprijetih celičnih linijah. | Ni potrebno v suspenzijskih celičnih linijah. |
| Donos | |
| Prilepljene celične linije povzročajo nižji donos. | Suspenzijske celične linije povzročijo večji donos. |
Povzetek – adherentne in suspenzijske celične linije
Ohranjanje celičnih linij je pomemben proces pri gojenju celic tako za kulture živalskih celic kot tudi za kulture rastlinskih tkiv. Poleg tega se celične linije vzdržujejo tudi za mikrobne celice, ki se pogosto uporabljajo v industrijskih procesih. Celične linije lahko imenujemo adherentne celične linije ali suspenzijske celične linije. Adherentne celične linije izhajajo iz adherentnih primarnih celičnih kultur in so odvisne od sidranja. Suspenzijske celične linije izhajajo iz suspenzijskih primarnih celičnih kultur. Te celice obstajajo v tekočem mediju in za rast celic je potrebno nenehno mešanje celic. To je razlika med adherentnimi celičnimi linijami in suspenzijskimi celičnimi linijami.
