Ključna razlika med knock in in knockout je odvisna od metode, uporabljene za ustvarjanje transgenega organizma. Pri vnosu gena pride do vstavitve novega gena, medtem ko pri izločitvi gena pride do odstranitve obstoječega gena, da se ustvari transgeni organizem.
Transgeni organizmi so organizmi s spremenjeno genetsko zgradbo. "Rekombinantni organizmi" so sinonim zanje. V večini primerov imajo transgeni organizmi koristne lastnosti. Pri ustvarjanju transgenih organizmov postanejo tarča geni. Glede na potrebo lahko gen vnesemo ali odstranimo. Gene knock in se nanaša na uvedbo novega gena, medtem ko se gen knockout nanaša na odstranitev gena.
Kaj je Knock In?
Knock in ali trkanje gena je postopek vstavitve novega gena v organizem. Vstavljeni gen mora delovati ob vstavitvi. Različne tehnike genskega inženiringa izvajajo proces vložka gena. Po vnosu gena pride do nastanka transgenega organizma. Tehnologija rekombinantne DNK se nanaša tudi na proces ustvarjanja genskega udarca. V tem procesu je treba genom organizma prerezati na določenih mestih z uporabo restrikcijskih encimov, nato pa pride do vstavitve ciljnega gena. Po vstavitvi encim ligaza zapre nov gen v genom in ustvari rekombinantni organizem.
Rekombinantni mikroorganizmi se pogosto uporabljajo za proizvodnjo želenih izdelkov, kot so vitamini, encimi, hormoni v industrijskem obsegu. Poleg tega je običajna uporaba genskega udarca pri miših v raziskovalne namene. Prikazujejo, kako se različni geni izražajo in obnašajo v različnih okoljskih in zdravstvenih pogojih. Zato je za določitev večine načinov zdravljenja različnih bolezni pomembno uporabiti gensko trkanje pri miših.
Kaj je Knockout?
Knockout ali genski knockout je proces popolne odstranitve gena iz organizma. Ta določen gen je med procesom izločanja popolnoma deaktiviran. Za izločitev gena so potrebne različne tehnike genskega inženiringa. Nastali organizem je transgenski organizem s spremenjeno genetsko sestavo. Popolna deaktivacija določenega gena poteka bodisi z vnosom mutacije v določen gen bodisi z odstranitvijo določenega fragmenta gena z restrikcijsko prebavo.
Slika 02: Gensko izločene miši
Prvič, genski izpad je vključeval samo bakterijo, imenovano Escherichia coli. Vendar je bilo trenutno ustvarjenih veliko izločenih miši. Knockout miši igrajo pomembno vlogo v raziskovalnih študijah. Zagotavljajo zaključke o tem, kako izbris določenih genov vpliva na preživetje in obstoj organizma. Vendar pa obstaja veliko etičnih omejitev v zvezi s tem konceptom.
Genski knockout ima pomembno vlogo pri analizi genetike različnih zdravstvenih stanj in ocenjevanju učinkovitosti terapij na različnih genih.
Kakšne so podobnosti med knock in in knockout?
- Oba uporabljata tehnologijo rekombinantne DNK in različne genetske tehnike.
- Knock-in in knock-out gena povzročita nastanek transgenega organizma.
- Mogoče jih je narediti na živih organizmih katere koli organizacijske ravni.
- Obe metodi široko uporabljamo v raziskavah in industrijskih aplikacijah.
Kakšna je razlika med knock in in knockout?
Razlika med knock in in knockout je odvisna od tehnike proizvodnje transgenega organizma. Knock in ali gene knock in je proces vstavitve novega gena v organizem. Nasprotno pa je izločitev gena proces popolne deaktivacije ali odstranitve želenega gena. Vsaka metoda daje različne rezultate, odvisno od spremembe.
Spodnja infografika predstavlja več informacij o razliki med knock in in knockout.
Povzetek – Knock In vs Knockout
Knock in in knockout se nanašata na dve metodi ustvarjanja transgenih organizmov z vstavitvijo ali popolno deaktivacijo genov. Tako sta ti dve metodi pomembni pri raziskavah in v različnih industrijskih aplikacijah. Tehnologija rekombinantne DNK je postopek ustvarjanja teh genskih vložkov in izločitev genov. Gene knock in in knockout igrata koristno vlogo; vendar pa je etična omejitev v ozadju ustvarjanja genskega knock in knockouta predmet razprave v znanstveni skupnosti. Torej, to povzema razliko med knock in in knock out.
