Ključna razlika med radioimunološkim in imunoradiometričnim testom je, da se pri radioimunskem testu vzorec ali spojina, ki jo merimo, pred kombinacijo kombinira z radioaktivnim antigenom, medtem ko se pri imunoradiometričnem testu vzorec ali spojina takoj združi z radioaktivno označenim protitelesa.
Imunotest je biokemijski test, ki zazna prisotnost ali koncentracijo makromolekul v raztopini z uporabo protitelesa ali antigena. Za merjenje antigenov v vzorcu se uporabljajo fluorescentna in radioaktivna protitelesa. Sprva so protitelesa uporabljali v tehnikah obarjanja, kot so imunoprecipitacija, imunodifuzija in imunska elektroforeza za analizo serumskih beljakovin. Trenutno se za merjenje zdravil, tumorskih markerjev in hormonov uporabljajo zelo občutljive tehnike, kot so radioimunski in imunoradiometrični testi.
Kaj je radioimunski test?
Radioimunski test (RIA) je imunski test, ki uporablja postopno tvorbo radioaktivnih elementov v kompleksih antigen-protitelo. RIA običajno uporablja radioaktivna protitelesa za odkrivanje količine antigena v vzorcu. RIA je zelo specifičen in zelo občutljiv in vitro test. Načelo RIA je konkurenčno zavezujoče. Tukaj radioaktivni antigen tekmuje z neradioaktivnim antigenom za konstantno količino protiteles ali receptorskih vezavnih mest. RIA zahteva posebno licenco in previdnostne ukrepe, ker se uporabljajo radioaktivne snovi, in ostaja med najcenejšimi tehnikami.
Slika 01: Imunski test
Med RIA se znana količina antigena pogosto naredi radioaktivna z označevanjem z gama-radioaktivnimi izotopi joda, vezanega na tirozin. Nato se ta antigen kombinira z znano količino protiteles. Tu se antigen in protitelo specifično vežeta drug na drugega. Nato dodamo vzorec krvnega seruma, da sprožimo kompetitivno reakcijo med označenimi antigeni in neoznačenimi antigeni v serumu s specifičnimi protitelesi. Pri tej reakciji protitelesa sprostijo določeno količino označenega antigena. Ta količina je sorazmerna z razmerjem med označenim in neoznačenim antigenom. Nazadnje se ustvari vezavna krivulja za izpeljavo količine antigena v pacientovem krvnem serumu.
Kaj je imunoradiometrični test?
Imunoradiometrični test (IRMA) je imunski test, ki uporablja radioaktivno označena protitelesa. V IRMA so protitelesa označena z radioizotopi. Ta protitelesa se vežejo na antigene, prisotne v določenem vzorcu. V pozitivnem vzorcu se protitelesa, ki so radioaktivno označena, vežejo na proste epitope antigenov. To tvori kompleks antigen-protitelo.
Med drugo reakcijo se označena protitelesa, ki niso vezana, odstranijo z antigenom v trdni fazi. Preostalo število radioaktivnih protiteles v raztopini je neposredno odvisno od koncentracije antigena. IRMA je znan kot test presežka reagenta, kjer se kot reagent uporabi presežek radioaktivno označenega protitelesa. Tukaj je dovoljena reakcija prekomerne koncentracije označenega protitelesa ali antigena. Kot zadnji korak ločimo protitelesa, vezana na antigen, in prosta protitelesa, frakcijo, vezano na antigen, pa podvržemo radioaktivnim testom. Tukaj je aktivnost frakcije neposredno sorazmerna s koncentracijo antigena.
Kakšne so podobnosti med radioimunološkim in imunoradiometričnim testom?
- Tako radioimunski kot imunoradiometrični test sta imunska testa, ki uporabljata radioaktivne elemente pri postopni tvorbi kompleksov antigen-protitelo.
- Tvorijo kompleks antigen-protitelo.
Kakšna je razlika med radioimunološkim in imunoradiometričnim testom?
Radioimunotest je imunski test, ki določa ravni protiteles z antigenom, označenim z radioizotopom, medtem ko je imunoradiometrični test test presežka reagenta, ki uporablja presežek koncentracije radioaktivno označenega protitelesa. To je torej ključna razlika med radioimunološkim in imunoradiometričnim testom. IRMA lahko zagotovi večjo občutljivost kot RIA. Pri RIA so antigeni označeni z gama-radioaktivnimi izotopi joda, medtem ko so pri IRMA protitelesa označena z izotopi joda. Torej, to je tudi razlika med radioimunološkim in imunoradiometričnim testom. Ker je IRMA tehnika presežka reagenta, se test izvede v krajšem času kot RIA.
Naslednja tabela povzema razlike med radioimunološkim in imunoradiometričnim testom.
Povzetek – Radioimunotest proti imunoradiometričnemu testu
Radioimunotest je imunski test, ki uporablja radioaktivne elemente v postopnem nastajanju za določanje ravni protiteles. RIA običajno uporablja radioaktivna protitelesa. Radioaktivni antigen tekmuje z neradioaktivnim antigenom za konstantno količino protiteles ali receptorskih vezavnih mest. Imunoradiometrični test je imunski test, ki se izvaja za določanje ravni antigena v vzorcu z uporabo radioaktivno označenih protiteles. Ta protitelesa se vežejo na antigene, prisotne v določenem vzorcu. Na koncu vsakega testa se tvori kompleks antigen-protitelo. Za pridobitev rezultatov testov se nariše krivulja vezave. Pri radioimunskem testu je količina označenega antigena sorazmerna z razmerjem med označenim in neoznačenim antigenom, pri imunoradiometričnem testu pa je aktivnost frakcije, vezane na antigen, neposredno sorazmerna s koncentracijo antigena. To je povzetek razlike med radioimunološkim in imunoradiometričnim testom.
