Ključna razlika med gelsko in papirnato elektroforezo je v tem, da je medij za ločevanje pri gelski elektroforezi agarozni gel, medtem ko je medij za ločevanje pri papirni elektroforezi papirni trak, potopljen v pufrsko raztopino.
Elektroforeza je analitična tehnika, ki je uporabna za analizo vzorca z uporabo električnih lastnosti kemičnih vrst, prisotnih v tem vzorcu. Tu lahko opazujemo gibanje razpršene topljene snovi v analiziranem mediju. Zato lahko določimo gibanje kemične vrste glede na medij. Elektroforeza v gelu in elektroforeza na papirju sta dve pomembni tehniki v kemiji.
Kaj je gelska elektroforeza?
Gelsko elektroforezo lahko opišemo kot metodo ločevanja in analize makromolekul glede na velikost in naboj. Makromolekule v tem kontekstu se lahko nanašajo na DNA, RNA, beljakovine in njihove fragmente. Ta metoda je uporabna v klinični kemiji za ločevanje proteinov po naboju ali velikosti. Poleg tega je v biokemiji in molekularni biologiji pomembno ločevanje mešane populacije fragmentov DNA in RNA po njihovi dolžini za oceno velikosti fragmentov DNA in RNA. Poleg tega ga lahko uporabimo za ločevanje beljakovin po njihovem naboju.
Slika 01: Instrumenti za gelsko elektroforezo
Molekule nukleinske kisline lahko ločimo z uporabo električnega polja za gibanje negativno nabitih molekul skozi matriko agaroze ali drugih snovi. V tem procesu se lahko krajše molekule premikajo hitreje, medtem ko se daljše molekule premikajo počasneje. To je zato, ker se krajše molekule zlahka premikajo skozi pore gela. To gibanje drobcev skozi pore imenujemo "sejanje". Poleg tega s to metodo običajno ne moremo ločiti beljakovin glede na njihovo velikost, ker so beljakovine prevelike, da bi jih presejali iz por gela. Vendar pa lahko ta postopek uporabimo za ločevanje nanodelcev.
Kaj je papirna elektroforeza?
Papirno elektroforezo lahko opišemo kot ločevanje s pomočjo filtrirnih papirnatih trakov, namočenih v pufersko raztopino. Na splošno uporabljamo dietilbarbiturno kislino in barbiturno kislino, raztopljeno v alkalijah, kot pufrsko raztopino. Vrednost pH te pufrske raztopine je pH 8,6. Še več, na papir lahko položimo majhno količino seruma, skozi katerega nato nekaj ur teče enosmerni tok.
Papirna elektroforeza je pomembna za ločevanje majhnih, nabitih molekul, vključno z aminokislinami in majhnimi beljakovinami. Tu moramo trak filtrirnega papirja navlažiti s pufrom in konce traku potopiti v puferske rezervoarje, ki vsebujejo elektrode. Prva oseba, ki je poročala, da je uporabila to metodo, je bil Konig leta 1937. V svojih ugotovitvah je uvedel s papirjem namočen pufer za consko elektroforezo in predlagal tudi UV detekcijo.
Kakšna je razlika med gelsko in papirnato elektroforezo?
Elektroforeza je analitična tehnika, ki je uporabna za analizo vzorca z uporabo električnih lastnosti kemičnih vrst, prisotnih v tem vzorcu. Elektroforeza v gelu in elektroforeza na papirju sta dve pomembni metodi elektroforeze. Ključna razlika med gelsko in papirnato elektroforezo je v tem, da je medij za ločevanje pri gelski elektroforezi agarozni gel, medtem ko je medij za ločevanje pri papirni elektroforezi papirni trak, potopljen v pufersko raztopino.
Spodaj je povzetek razlik med gelsko in papirnato elektroforezo v obliki tabele za vzporedno primerjavo.
Povzetek – elektroforeza z gelom in papirjem
Gel elektroforeza je metoda ločevanja in analize makromolekul glede na velikost in naboj, medtem ko je papirna elektroforeza ločevanje s pomočjo filtrirnih papirjev, namočenih v pufersko raztopino. Ključna razlika med gelsko in papirnato elektroforezo je v tem, da je medij za ločevanje pri gelski elektroforezi agarozni gel, medtem ko je medij za ločevanje pri papirni elektroforezi papirni trak, potopljen v pufersko raztopino.
