Ključna razlika med Bradfordovim in Lowryjevim proteinskim testom je, da Bradfordov proteinski test temelji na absorbančnem premiku barvila Coomassie briljantno modra G-250, medtem ko Lowryjev proteinski test temelji na reakciji bakrovih ionov (Cu+) ionov nastane z oksidacijo peptidnih vezi s Folin–Cioc alteu reagentom.
Analiza je analitična tehnika, ki pomaga opredeliti glavne funkcionalne komponente vzorca. Zato je lahko test kvalitativni ali kvantitativni test. Številna področja, vključno z laboratorijsko medicino, farmakologijo, okoljsko biologijo, molekularno biologijo, biokemijo in imunologijo, rutinsko uporabljajo to vrsto testov. Bradfordov in Lowryjev proteinski test sta dva biokemijska testa, ki določata koncentracijo beljakovin v raztopini vzorca. Oba testa za zagotavljanje rezultatov uporabljata kolorimetrične tehnike.
Kaj je Bradfordov proteinski test?
Bradfordov test beljakovin je hiter spektroskopski analitični postopek za analizo beljakovin. Pokaže visoko natančnost pri merjenju koncentracije beljakovin v raztopini. Marion Bradford je ta postopek uvedla leta 1976. V tem testu skupna reakcija temelji na aminokislinski sestavi izmerjenih beljakovin. Z drugimi besedami, Bradfordov proteinski test je kolorimetrični test. Uporablja barvilo Coomassie briljantno modra. Zato je ta kolorimetrični test beljakovin odvisen od absorbančnega premika barvila. Coomassie brilliant blue G-250 obstaja v treh oblikah: kationski (rdeči), anionski (modri) in nevtralni (zeleni). V kislih pogojih se rdeča oblika barvila pretvori v modro. Potrjuje vezavo proteina. Če beljakovine ni, lahko raztopina ostane rjave barve.
Slika 01: Bradfordov test beljakovin
Bradfordov proteinski test se razlikuje od drugih proteinskih testov, saj je manj dovzeten za motnje različnih kemičnih spojin, prisotnih v raztopini proteina. Te spojine vključujejo natrij, kalij, glukozo in saharozo itd.
Kaj je Lowryjev proteinski test?
Lowryjev proteinski test je biokemijski test, ki se uporablja za določanje skupne ravni beljakovin v raztopini. Oliver H. Lowry je oseba, ki je leta 1940 razvila ta reagent. Postopek prikazuje celotno koncentracijo beljakovin v raztopini s spremembo barve, ki je sorazmerna s koncentracijo beljakovin v raztopini. Zato je to tudi kolorimetrični test beljakovin.
Reakcija med bakrovimi ioni (Cu+), ki nastanejo z oksidacijo peptidnih vezi, in reagentom Folin–Cioc alteu je osnova tega postopka. Ta reagent vsebuje tudi fosfomolibdno kislino in fosfor-volframovo kislino. Vendar reakcijski mehanizem Lowryjeve beljakovinske analize ni dobro razumljen. Vključuje pa oksidacijo ostankov cisteina, triptofana in tirozina z redukcijo Folin–Cioc alteujevega reagenta.
Slika 02: Test beljakovin Lowry
Ostanki cisteina prispevajo k absorbanci, opaženi pri Lowryjevem testu proteina, rezultat reakcije pa je briljantno modra molekula; heteropoli molibden modra. Redukcija te molekule se meri z absorbanco pri 660 nm. Zato koncentracija ostankov cisteina in triptofana, ki je reduciral Folin–Cioc alteujev reagent, sklepa o skupni koncentraciji proteina v raztopini.
Kakšne so podobnosti med testom beljakovin Bradford in Lowry?
- Beljakovinski testi Bradford in Lowry določajo koncentracijo beljakovin v raztopini.
- Obe metodi sta kolorimetrični metodi.
- Poleg tega je občutljivost obeh metod visoka.
Kakšna je razlika med Bradfordovim in Lowryjevim testom beljakovin?
Bradfordov in Lowryjev proteinski test sta dve vrsti testov, ki določata koncentracijo beljakovin v raztopini. Bradfordov proteinski test se opira na absorpcijski premik barvila Coomassie brilliant blue G-250, medtem ko je Lowryjev proteinski test odvisen od reakcije bakrovih ionov, ki nastanejo z oksidacijo peptidnih vezi, z reagentom Folin–Cioc alteu. Torej, to je ključna razlika med testom beljakovin Bradford in Lowry. Bradfordov test proteina traja 15 minut, da da rezultat, medtem ko Loweryjev test proteina potrebuje 40-60 minut, da da rezultat. Tako je to še ena razlika med testom beljakovin Bradford in Lowry. Poleg tega je Bradfordov proteinski test odvisen od sestave aminokislin, medtem ko je Lowryjev proteinski test delno odvisen od sestave aminokislin. Zato je to tudi razlika med testom beljakovin Bradford in Lowry.
Spodnja inforafika ponuja več podrobnosti o razliki med testom beljakovin Bradford in Lowry.
Povzetek – Bradford vs Lowry proteinski test
Analiza je analitična tehnika, ki se uporablja za karakterizacijo glavne funkcionalne komponente vzorca. Bradfordov in Lowryjev proteinski test sta dve vrsti beljakovinskih testov, ki delujeta s kolorimetričnimi tehnikami. Tako Bradfordov kot Lowryjev proteinski test določata koncentracijo beljakovin v raztopini. Vendar pa je ključna razlika med testom Bradford in Lowry Protein Assay v kolorimetrični tehniki, ki ju uporabljata. Bradfordov proteinski test uporablja Coomassie brilliant blue G-250, medtem ko Lowryjev proteinski test uporablja bakrove ione (Cu+) ione in reagent Folin–Cioc alteu. Poleg tega daje Bradfordova metoda hitrejše rezultate kot Lowryjeva beljakovinska analiza. Vendar sta obe metodi zelo občutljivi metodi in sta podvrženi motnjam različnih snovi.
