Ključna razlika med diferencialnim centrifugiranjem in centrifugiranjem z gradientom gostote je v tem, da diferencialno centrifugiranje loči delce v mešanici na podlagi velikosti delcev, medtem ko centrifugiranje z gradientom gostote loči delce v mešanici na podlagi gostote delcev.
Centrifugiranje je metoda ločevanja različnih komponent v mešanici analita. Ta metoda vključuje vrtenje vzorca okoli fiksne osi, kar povzroči nastanek centrifugalne sile. Centrifugalna sila povzroči, da se delci v vzorcu premikajo navzdol skozi tekoči medij. Ta proces povzroči sedimentacijo delcev ali celic različnih velikosti in gostot z različnimi hitrostmi.
Kaj je diferencialno centrifugiranje?
Diferencialno centrifugiranje je analitična tehnika, pri kateri lahko ločimo delce v mešanici glede na velikost delcev. Je najpreprostejša oblika centrifugiranja in se imenuje tudi diferencialno peletiranje. Ta metoda je pomembna pri ločevanju komponent v celici. Delci različnih velikosti se med centrifugiranjem sedimentirajo z različnimi hitrostmi. Z drugimi besedami, veliki delci se usedajo hitreje kot manjši delci. Poleg tega lahko hitrost sedimentacije povečate s povečanjem centrifugalne sile.
Ko razmišljamo o uporabi, je diferencialno centrifugiranje uporabno pri zbiranju celic ali proizvodnji surovih subceličnih frakcij iz tkivnega homogenata. Npr. homogenat jeter vsebuje jedra, mitohondrije, lizosome in membranske vezikle. Če ta homogenat centrifugiramo pri nizki hitrosti in kratek čas, lahko dobimo velika jedra kot pelet. Če uporabimo visoko centrifugalno silo, lahko dobimo mitohondrije v peleti. Vendar pa so biološki vzorci vedno nagnjeni k kontaminaciji.
Kaj je centrifugiranje z gradientom gostote?
Centrifugiranje z gradientom gostote je analitična tehnika, pri kateri lahko ločimo delce v mešanici analitov na podlagi gostote delcev. Pri tej metodi se snovi koncentrirajo v raztopini cezijevih soli ali v saharozi. Metoda vključuje frakcioniranje delcev na podlagi gostote vzgona. Gradient gostote pri tej metodi je medij cezijeve soli ali saharoze. Obstajata dve vrsti centrifugiranja z gradientom gostote: centrifugiranje s hitrostjo zonla in izopiknično centrifugiranje.
Centrifugiranje po območjih hitrosti vključuje ločevalni medij, ki ima večplastno strukturo z ozko cono na vrhu gradienta gostote. V tem procesu se delci gibljejo z različnimi hitrostmi pod vplivom centrifugalne sile, odvisno od gostote delcev. Običajno vsi delci proizvajajo pelete, ker je gostota delcev večja od gradienta gostote.
Izopiknično centrifugiranje je druga vrsta metode centrifugiranja z gradientom gostote. Začne se s homogeno raztopino. Pod centrifugalno silo se delci v mešanici analitov premikajo, dokler gostota delcev ni podobna gradientu gostote. Zato lahko to tehniko imenujemo tudi ravnotežno centrifugiranje.
Kakšna je razlika med diferencialnim centrifugiranjem in centrifugiranjem z gradientom gostote?
Diferencialno centrifugiranje in centrifugiranje z gradientom gostote sta dve vrsti postopkov centrifugiranja, ki sodelujeta pri ločevanju komponent v mešanici analita. Ključna razlika med diferencialnim centrifugiranjem in centrifugiranjem z gradientom gostote je v tem, da diferencialno centrifugiranje ločuje delce v zmesi na podlagi velikosti delcev, medtem ko centrifugiranje z gradientom gostote ločuje delce v zmesi na podlagi gostote delcev.
Spodnja infografika prikazuje več razlik med diferencialnim centrifugiranjem in centrifugiranjem z gradientom gostote.
Povzetek – diferencialno proti centrifugiranju z gradientom gostote
Diferencialno centrifugiranje in centrifugiranje z gradientom gostote sta dve vrsti postopkov centrifugiranja, ki sodelujeta pri ločevanju komponent v mešanici analita. Ključna razlika med diferencialnim centrifugiranjem in centrifugiranjem z gradientom gostote je v tem, da diferencialno centrifugiranje ločuje delce v zmesi na podlagi velikosti delcev, medtem ko centrifugiranje z gradientom gostote ločuje delce v zmesi na podlagi gostote delcev.
