Ključna razlika med izokratsko in gradientno elucijo je, da se izokratična elucija nanaša na vzdrževanje konstantne koncentracije v mobilni fazi, medtem ko se gradientna elucija nanaša na vzdrževanje spremenljive koncentracije v mobilni fazi.
Izraza izokratična in gradientna elucija se uporabljata v kromatografiji. Med kromatografskim potekom uporabljamo stacionarno fazo, ki je negibljiva snov, skupaj z mobilno fazo, gibljivo snovjo. Izokratna in gradientna elucija opisujeta lastnosti mobilne faze.
Kaj je izokratska elucija?
Izokratska elucija je izraz, ki se uporablja v kromatografiji, ko ima mobilna faza konstantno koncentracijo. Pri tem je koncentracija mobilne faze konstantna skozi celoten kromatografski proces. V tem procesu lahko opazimo širino vrha, ki linearno narašča z retenzijskim časom v kromatogramu. Vendar to vodi do slabosti – vrhovi pozne elucije za pozno elucijo postanejo zelo ravni in široki. Zato je te široke vrhove težko prepoznati kot vrhove.
Poleg tega se pri izokratičnem eluiranju selektivnost ne spreminja glede na dimenzije kolone. To pomeni, da selektivnost ni odvisna od sprememb dimenzij stolpcev. Tukaj se dolžina in premer štejeta za dimenzije stolpca. Zato se vrhovi eluirajo v enakem vrstnem redu.
Kaj je gradientna elucija?
Gradientna elucija je izraz, ki se uporablja v kromatografiji, kjer ima mobilna faza spremenljivo koncentracijo. Z drugimi besedami, ni treba, da koncentracija mobilne faze ostane konstantna. Na primer, pri HPLC običajna metoda ločevanja na začetku uporablja 10 % metanol in konča pri 90 % s postopnim povečevanjem koncentracije. Mobilna faza ima dve komponenti: šibko topilo in močno topilo. Šibko topilo omogoča, da se topljenec počasi eluira, medtem ko močno topilo povzroči hitro eluiranje topljenca. V reverzno fazni kromatografiji uporabljamo vodo kot šibko topilo in organsko topilo kot močno topilo.
Slika 01: HPLC
Poleg tega metoda gradientne elucije zmanjša kasnejše eluirane komponente, da hitreje eluirajo, kar daje ozek vrh v kromatogramu. Ta metoda izboljša obliko vrha in tudi višino vrha. Poleg tega se pri tehniki gradientne elucije vrstni red elucije spreminja s spremembami dimenzij kolone.
Kakšna je razlika med izokratsko in gradientno elucijo?
Izraza izokratična in gradientna elucija se uporabljata v kromatografiji. Izokratična in gradientna elucija opisujeta lastnosti mobilne faze. Ključna razlika med izokratično in gradientno elucijo je, da se izokratična elucija nanaša na vzdrževanje stalne koncentracije v mobilni fazi, medtem ko se gradientna elucija nanaša na vzdrževanje spremenljive koncentracije v mobilni fazi.
Pri tehniki izokratične elucije se širina vrha linearno povečuje z retencijskim časom. Vendar pa je pri tehniki gradientne elucije zadrževanje komponent, ki se kasneje eluirajo, zmanjšano, tako da je elucija hitrejša in daje ozke vrhove. Poleg tega pri izokratni eluciji selektivnost ni odvisna od dimenzij kolone, pri gradientni eluciji pa se selektivnost spreminja s spreminjanjem dimenzij kolone.
Naslednja tabela povzema razlike med izokratskim in gradientnim eluiranjem.
Povzetek – izokratsko proti gradientni eluciji
Izokratska elucija in gradientna elucija opisujeta lastnosti mobilne faze. Ključna razlika med izokratično in gradientno elucijo je, da se izokratična elucija nanaša na vzdrževanje stalne koncentracije v mobilni fazi, medtem ko se gradientna elucija nanaša na vzdrževanje spremenljive koncentracije v mobilni fazi.
